[發(fā)明專利]一種人工合成的信號肽及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310332218.2
• 申請日: 2010-09-17
• 公開（公告）號: CN104059128A
• 公開（公告）日: 2014-09-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周永春;張玉晶;厲穎
• 申請（專利權(quán)）人: 上海凱茂生物醫(yī)藥有限公司;上海復(fù)星醫(yī)藥（集團）股份有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C12N15/11;C12N15/85;C12N5/10;C12P21/00
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所 31219
• 代理人: 許亦琳;余明偉

1.一種人工合成的用于引導(dǎo)哺乳動物來源蛋白質(zhì)在哺乳動物細(xì)胞中分泌表達(dá)的信號肽，所述信號肽的氨基酸序列為SEQ ID NO:5。

2.如權(quán)利要求1所述信號肽用于在哺乳動物宿主細(xì)胞中引導(dǎo)哺乳動物來源蛋白的分泌表達(dá)。

3.一種多核苷酸，所述多核苷酸編碼權(quán)利要求1所述信號肽。

4.如權(quán)利要求3所述多核苷酸，其特征在于，所述多核甘酸的序列為SEQ ID NO:10。

5.一種哺乳動物細(xì)胞表達(dá)載體，所述表達(dá)載體含有權(quán)利要求3或4所述多核苷酸及編碼哺乳動物來源的蛋白質(zhì)的多核苷酸。

6.如權(quán)利要求5所述哺乳動物細(xì)胞表達(dá)載體，其特征在于，權(quán)利要求3或4所述多核苷酸緊接在所述編碼哺乳動物來源的蛋白質(zhì)的多核苷酸前端。

7.如權(quán)利要求5所述哺乳動物細(xì)胞表達(dá)載體，其特征在于，進一步的，所述表達(dá)載體中，權(quán)利要求3或4所述多核苷酸的前端添加有Kozak序列。

8.如權(quán)利要求5所述哺乳動物細(xì)胞表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體的啟動子選自EF-1α啟動子、CMV啟動子、SV40晚期啟動子或SV40早期啟動子。

9.如權(quán)利要求5所述哺乳動物細(xì)胞表達(dá)載體，其特征在于，所述哺乳動物來源的蛋白質(zhì)選自促紅細(xì)胞生成素，各種具有促紅細(xì)胞生成素活性的改構(gòu)促紅細(xì)胞生成素，以及抗體。

10.一種哺乳動物宿主細(xì)胞，所述宿主細(xì)胞為權(quán)利要求5-9任一所述表達(dá)載體所轉(zhuǎn)染。

11.如權(quán)利要求10所述哺乳動物宿主細(xì)胞，其特征在于，所述哺乳動物宿主細(xì)胞為CHO、BHK、SP2/0或C127。

12.一種哺乳動物來源的蛋白質(zhì)的生產(chǎn)方法，為在適合表達(dá)哺乳動物來源的蛋白質(zhì)的條件下，培養(yǎng)權(quán)利要求10或11所述哺乳動物宿主細(xì)胞，而后從培養(yǎng)物中分離出所述哺乳動物來源的蛋白質(zhì)。

13.如權(quán)利要求12所述哺乳動物來源的蛋白質(zhì)的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述哺乳動物來源的蛋白質(zhì)選自促紅細(xì)胞生成素，各種具有促紅細(xì)胞生成素活性的改構(gòu)促紅細(xì)胞生成素，以及抗體。