[發(fā)明專利]一種馬纓杜鵑組織培養(yǎng)快速繁殖方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310324529.4
• 申請日: 2013-07-30
• 公開（公告）號: CN103371103A
• 公開（公告）日: 2013-10-30
• 發(fā)明（設計）人: 朱春艷;顧宏輝;余金良;朱丹華;盛小光
• 申請（專利權）人: 杭州植物園
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 杭州豐禾專利事務所有限公司 33214
• 代理人: 王從友

1.一種馬纓杜鵑組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于該方法按如下步驟進行：

1）外植體的選擇：春季或秋季從已開花馬纓杜鵑母株上剪取帶有4-6個潛伏芽的當年生新發(fā)枝條；

2）外植體滅菌：剪去枝條葉片，先用自來水浸泡并沖洗30-60分鐘，用洗潔精洗滌1-2次后吸干；然后，在無菌室超凈臺上用75%酒精消毒15-30秒，用無菌水沖洗3-5遍，再用0.1％氯化汞消毒12-15分鐘，最后用無菌蒸餾水沖洗3-5遍后吸干；

3）新發(fā)枝條誘導培養(yǎng)：將滅好菌的枝條切除莖尖，余下的枝條剪成2-3cm長的莖段，每段帶有1-2個腋芽，斜插入誘導培養(yǎng)基中；于23-26℃光16小時，黑8小時培養(yǎng)25-35天后，莖段潛伏芽發(fā)育生長出新枝條至2-4cm長；所述的誘導培養(yǎng)基由以下組分構成：WPM基本培養(yǎng)基?+?ZT?3.0-4.0?mg/L?+?NAA0.2-0.4?mg/L?+?20?g/L?蔗糖或白糖?+?6-10?g/L?瓊脂，pH4.8-5.2，高溫滅菌；

4）增殖培養(yǎng)：剪取新長出的枝條，去頂芽后插入增殖培養(yǎng)基中，于23-26℃光16小時，黑8小時，培養(yǎng)45-60天后，莖段長出叢生芽；此階段可重復進行；所述的增殖培養(yǎng)基由以下組分構成：?WPM基本培養(yǎng)基?+?ZT?1.0-2.0?mg/L?+?NAA?0.1-0.2?mg/L?+?20g/L?蔗糖或白糖?+?6-10?g/L?瓊脂，pH?4.8-5.2，高溫滅菌；

5）壯苗培養(yǎng)：將長到1-2cm長的叢生芽剪切移入壯苗培養(yǎng)基中，于23-26℃光16小時/黑8小時，培養(yǎng)25-35天，待長到3-5cm后移入基質中，進行瓶外生根；所述的壯苗培養(yǎng)基由以下組分構成：WPM基本培養(yǎng)基?+?ZT?0.5-1.0?mg/L?+?NAA0.05-0.1?mg/L?+?20g/L?蔗糖或白糖?+?6-10?g/L?瓊脂，pH?4.8-5.2，高溫滅菌；

6）瓶外生根：在每年10至次年3月，將長到3-5?cm高的瓶苗在室外放置1周，洗去枝條上的瓊脂后移入含有含泥炭：珍珠巖：蛭石體積比2：1：1的基質中，在保濕保溫條件下生長，1-2個月后生根。