[發明專利]一種11個耳聾易感基因的PCR-LDR檢測試劑盒

無效

• 申請號: 201310321447.4
• 申請日: 2013-07-29
• 公開（公告）號: CN103352086A
• 公開（公告）日: 2013-10-16
• 發明（設計）人: 步迅;張全芳;劉艷艷;夏子芳
• 申請（專利權）人: 山東省農業科學院高新技術研究中心
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種同時檢測11個耳聾易感基因的PCR-LDR檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括包裝盒體(1)，PCR擴增和LDR反應試劑；

所述PCR擴增試劑分別為PCR擴增Reaction?Mix(2)和(3)；所述LDR反應試劑為LDR反應Probe?Mix(4)和(5)；

所述11個耳聾易感基因為GJB2：235delC、299-230delA＞T、176-191del16，SLC26A4：IVS7-2A＞G、2168A＞G、1226G＞A、1174A＞T、1975G＞C、2027T＞A，線粒體12SrDNA：1555A＞G和1494C＞T；

LDR通用模板：CCCATTAGTCTTGCGAGTACAGGTTTGCG

通用熒光探針：P-GAATCAATCAGACTG-FAM???15

其中用于GJB2基因三個位點的引物序列如下：

GJB2_176_M：P-TGGCTGCAGGGTGTTGCATTTTCGCAAACCTGTACTC

GJB2_176del：TTTGCTAACTTCCCCTCTGACCCA

GJB2_176_NOdel：TTTATCGTAGCACACGTTCTTGCAGCC

GJB2_235_M：P-GCTCGATAATGGGAAGTAGTTTTTTCGCAAACCTGTACTC

GJB2_235_delC：TTTTTGCGTGGACACGAAGATCAGCTGCA

GJB2_235_C：TTTTTTTGCGTGGACACGAAGATCAGCTGCAG

GJB2_299_M：P-ATGTGCGGTAGGAAACGTGTTTTTTTTTTCGTAAACGGTACTC

GJB2_299_delAT：TTTTTTTTTTTGGTGCCTTTCCTCTTCTTCTC

GJB2_299_AT：TTTTTTTTTTTTGACTATAGTCCTCTTCTTCTCAT

SLC26A4基因的6個檢測位點引物序列如下：

1975_M：P-AAGGCGTTGCTTTGAAACTTTTCGCAAACGAGTTGTC

1975_C：TAAAGATCATGCTCCAGTCTCACCAAG

1975_G：TTTAAAGATCATCCTCCACCTTTCAGCTACAC

2027_M：P-GAGTTCTCACTAAGAACAACTTTTTTTCGCAAACCTCTAATC

2027_T：TTTTTTAAAACCCTCAACACTTAGCCCCGCA

2027_A：TTTTTTTTTAAAACTCAAAGGCTAACGGCT

1174_M：P-GCCGAACCCACTACGCATGAATTTTTTTTTCGCAAAATCAGCC

1174_A：TTTTTTTCGGCAAAGAACTGAGCTCATT

1174_T：TTTTTTTTTTCACCAGAATGATCCCTCAGAATCTG

1226_M：P-CCATCAAGAGCAGTACGTGACACTTTTTTTTTTTTTTCGCCTATGTGC

1226_G：TTTTTTTTTCCTGTCTCCTGCACCTGGAGTTAC

1226_A：TTTTTTTTTTTTCCGATGCGCTAGGCTGAACCTCT

IVS7-2_M：P-GAAATCCGAACTTAATCATGTGAATTTTTTTTTTTTTTTTTTCGCAAATGTACTC

56

IVS7-2_A：TTTTTTTTTTTGAAATCCCAGTAGCAATAATTGTCT

IVS7-2_G：TTTTTTTTTTTTTTGAAAGCAGTAGCCCTTATCCGACC

2168_M：P-GGCTGTCTAAACAATGTGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCCTAAACCAGGACAC

2168_A：TTTTTTTTTTTTTTTGGTTCCCATAGGTAGACTATAGGTCAT?????2168_G：TTTTTTTTTTTTTTTTTTGGTTCTGTCGAATAATCTACCTCACTAC

12s?rRNA基因的2個檢測位點的引物序列信息如下：

1494_M：P-CGATCGGGCGTCAGTGTCCCCGCTTTTTTTTTTTTCGCACCTCTGTACTC

1494_C：TTTTTTTTTTTCCTTTGAGATCTATACTTCTTGAGG

1494_T：TTTTTTTTTTTTTCCTTTGATCCTTATACAATGAGCCAACAA

1555_M：P-ATCATCCCTATAATCTGCGTATTTTTTTTTTTTTTTCGAATTCATCACTC

1555_G：TTTTTTTTTTTTTTAGTTAACTTACCCAGTTACTGACTTAG

1555_A：TTTTTTTTTTTTTTTTTAGCATCACGGTATAGATGTGCAACGACCCTA。