[發明專利]一種從牛奶中提取SOD的方法有效
| 申請號: | 201310319538.4 | 申請日: | 2013-07-25 |
| 公開(公告)號: | CN103361320A | 公開(公告)日: | 2013-10-23 |
| 發明(設計)人: | 趙永泉;張麗娟;蔡躍華;胡兆博 | 申請(專利權)人: | 天津核生科技生物工程有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/02 | 分類號: | C12N9/02 |
| 代理公司: | 天津市新天方有限責任專利代理事務所 12104 | 代理人: | 李道平 |
| 地址: | 301609 天津市靜*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 牛奶 提取 sod 方法 | ||
技術領域
本發明涉及食品領域,尤其是一種從牛奶中提取SOD的方法。
背景技術
《一種SOD復合酶及其制備方法》,此發明涉及一種保健品,特別是涉及一種SOD復合酶及其制備方法,從鮮牛奶中提取的清蛋白酶型SOD,其酶活力高,其具有抗氧化,延緩人體衰老等諸多功效。配方中的蜂膠具有降低血脂及膽固醇,和增強血管擴張力,降低血管脆性,活化細胞,提高免疫力等功效。二者經科學配伍后其功能效果大大提高,而且安全無毒無公害。
《牛乳中超氧化物歧化酶(SOD)的提純與鑒定》報道了牛乳中超氧化物歧化酶(SOD)的提純與鑒定。新鮮牛乳經超速離心,氯仿-乙醇處理,丙酮沉淀、透析、DEAE纖維素柱層析等步驟使其中Cu-ZnSOD得到了純化,提純后酶的比活為149.5V/mg。(孫慶林,等.牛乳中超氧化物歧化酶(SOD)的提純與鑒定[J].內蒙古農牧學院學報,1998(4):34-36)。
《牛乳及其中的超氧化物歧化酶》報道了牛乳及其中的超氧化物歧化酶。此文簡述了超氧化物歧化酶(SOD)的發現、在生物界分布及目前的開發利用情況,同時對牛乳中所含SOD的類型和含量、測定方法、提取和純化及其特性進行了簡要地介紹,并就生產強化SOD的牛乳及其乳制品的意義和可行性進行了探討。此文牛乳SOD的制備方法為,使用(NH4)2SO4鹽析,得到的沉淀物再溶于少量SMUF中,過柱,使用K2HPO4(pH7.4)洗脫,收集洗脫液凍干得成品。(馮啟浩.牛乳及其中的超氧化物歧化酶[J].中國乳品工業,1993(2):68-73)。
發明內容
本發明的目的是針對現有SOD提取技術的不足,提供一種從牛奶中提取SOD的方法,形成活性較高的SOD產品。
為實現上述的發明目的,本發明采取的實施方式如下:
(1)將生鮮牛奶、蒸餾水、95%乙醇提前預冷到10℃以下,備用;
(2)將預冷到10℃以下的蒸餾水與牛奶按照2∶1的比例進行混合;
(3)在上述混合液中加入牛奶量40%的葡萄糖酸銅和牛奶量30%的葡萄糖酸鋅,攪拌均勻,過濾,收集清液,備用;
(4)在上述清液中加入牛奶與蒸餾水總量2倍的乙醇,攪拌均勻;
(5)用30mol/L的氫氧化鈉溶液將上述溶液的pH值調至7-7.5,靜置5-8小時;
(6)過濾,收集濾液,加入牛奶與蒸餾水總量3倍的乙醇,攪拌均勻,靜置5-8小時;
(7)過濾,收集沉淀,低溫干燥、粉碎;
(8)乙醇蒸餾回收。
本發明的有益效果是:本發明的SOD產品,提取率高、活性高、成本低、提取工藝安全綠色無污染、設備簡單。
具體實施方式
以下結合實施例,對依據本發明提供的具體實施方式詳述如下:
實施例1
1.生鮮牛奶檢測合格后過濾凈化預冷到4℃,同時將蒸餾水和95%乙醇提預冷到4℃,
備用;
2.取預冷到10℃的蒸餾水200g與100g牛奶混合;
3.在上述混合液中加入40g的葡萄糖酸銅和30g的葡萄糖酸鋅,攪拌均勻過濾,收集清夜,備用;
4.在上述清夜中加入600g的冷乙醇,攪拌均勻;
5.用30mol/L的氫氧化鈉溶液將上述溶液的pH值調至7.4,靜置5小時;
6.過濾,收集濾液,加入900g冷乙醇,攪拌均勻,靜置6小時;
7.過濾,收集沉淀,低溫干燥、粉碎成細粉;
8.用鄰苯三酚自氧化法測SOD活性為122859U/g;
9.乙醇蒸餾回收。
實施例2
1.生鮮牛奶檢測合格后過濾凈化預冷到8℃,同時將蒸餾水和95%乙醇提預冷到8℃,備用;
2.取預冷到8℃的蒸餾水500g與250g牛奶混合;
3.在上述混合液中加入100g的葡萄糖酸銅和75g的葡萄糖酸鋅,攪拌均勻過濾,收集清夜,備用;
4.在上述清夜中加入1500g的冷乙醇,攪拌均勻;
5.用30mol/L的氫氧化鈉溶液將上述溶液的pH值調至7.3,靜置6小時;
6.過濾,收集濾液,加入2250g冷乙醇,攪拌均勻,靜置7小時;
7.過濾,收集沉淀,低溫干燥、粉碎成細粉;
8.用鄰苯三酚自氧化法測SOD活性為125015U/g;
9.乙醇蒸餾回收。
實施例3
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