[發明專利]一種用于檢測血液病原菌的細菌培養液無效
| 申請號: | 201310307599.9 | 申請日: | 2013-07-22 |
| 公開(公告)號: | CN103343157A | 公開(公告)日: | 2013-10-09 |
| 發明(設計)人: | 史煜波 | 申請(專利權)人: | 史煜波 |
| 主分類號: | C12Q1/04 | 分類號: | C12Q1/04;C12N1/20 |
| 代理公司: | 北京東正專利代理事務所(普通合伙) 11312 | 代理人: | 劉瑜冬 |
| 地址: | 315010*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 用于 檢測 血液 病原菌 細菌 培養液 | ||
技術領域
本發明屬于血液檢測技術領域,具體是一種用于檢測血液病原菌的細菌培養液。?
背景技術
全自動需氧血培養瓶是一種應用于醫學臨床檢驗領域的新型微生物培養系統,是與全自動血培養儀配套使用的新一代微生物檢測試劑。它由瓶體、固體傳感器和培養液等三部分組成,與全自動血培養儀器結合使用即可快速檢測血液或其他標本中是否感染細菌、真菌及分枝桿菌,從而為臨床迅速有效地進行抗感染治療提供診斷依據。全自動血培養系統最早在上個世紀九十年代由美國BD公司,法國梅里埃公司等開始研發,目前已經批量生產和銷售,對中國處于技術保密狀態,國外進口產品價格昂貴,給我國的醫療機構及患者帶來沉重的經濟負擔。目前我國國內只有上海奧普生物技術公司等少數生物企業從事此項研究,尚未形成產業化。研制質量優良,價格便宜的自動培養瓶,打破國際壟斷,不僅具有良好的經濟效益,并且能夠降低患者負擔,減少醫療費用,具有廣泛的社會效益。?
現在培養瓶中最重要的部分之一的培養液多數是增菌肉湯,它的檢測原理是提供細菌生長的必要營養物質,使致病的細菌快速生長,從而代謝的產物通過和化學試劑反應釋放出能夠被儀器識別的物理和化學信號,來檢測出血液致病的病原體,隨著檢測儀器的迅速發展,其精度及靈敏度也顯著的提高,而且抗生素類的藥物的發展及普遍使用,從而使培養液也必須發生相適應的變化,現在培養液的要求是使細菌繁殖的更快,還要拮抗中和血液內抗生素,從而確保檢測高效、省時、準確度高。?
發明內容
在檢測血液病原菌技術中,為了解決需氧型細菌在血液中的生長速度不夠快,導致檢測時間長的技術缺陷,本發明公開了一種用于檢測血液病?原菌的細菌培養液,實現顯著提高細菌繁殖的速度,且能夠拮抗中和血液中的抗生素,從而使細菌生長的速度快,縮短血液的檢測時間目的;另外,細菌代謝產物可以通過和培養液中碳酸氫鹽反應轉變成能被儀器識別的化學訊號,使血液檢測準確度高,因此在血液臨床檢驗領域擁有廣泛的應用前景。?
為達到上述目的,本發明采用的技術方案為,該培養液包括細菌生長所需的營養物質、抗凝血劑與拮抗抗生素試劑,三種成份的質量濃度比為35~52∶1~10∶5~20。?
所述細菌生長所需的營養物質可以由蛋白胨、胰胨、牛肉膏粉、心腦浸粉、葡萄糖中的一種或多種混合物與維生素和碳酸氫鹽組成,其質量濃度比為15~26∶0.01~0.10∶0.30~0.75;?
所述維生素可以由維生素A、維生素D、維生素E、B族維生素、維生素C中的一種或多種混合維生素組成;?
所述碳酸氫鹽由碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、碳酸氫鈣、碳酸氫銨中的一種或多種組成;抗凝血劑可以為肝素、乙二胺四乙酸鹽、枸椽酸鈉其中的任意的一種;能夠與血液中抗生素發生拮抗中和作用的試劑可以是聚茴香腦磺酸、對氨基苯甲酸、硫酸鎂、吸附抗生素復合樹脂中的一種或多種混合試劑;除此之外,在制備培養液時還需加入鹽或酸液、堿液之類用以提供適合細菌生長的PH環境。?
以上所述的細菌類型為需氧型細菌。?
如上述配方選擇帶有葡萄糖作為細菌生長的營養物質,則在制備培養液中應注意,除成份中的葡萄糖、吸附抗生素復合樹脂和碳酸氫鹽外,全部稱量混合,加熱溶解,溶解后需將溶液進行常溫冷卻,待稍冷卻時加入葡萄糖和無菌蒸餾水;再將培養液高壓蒸氣滅菌,同時冷卻至室溫;將碳酸氫鹽稱量溶于無菌蒸餾水中,單獨盛于不能漏氣且可以高壓滅菌的溶器內,高壓蒸氣滅菌,冷卻至室溫;在無菌操作臺中將兩者混合,用鹽、酸液或堿液調節PH值至7.2-7.3后,將培養液分裝于血培養瓶內用滅菌鍋進行滅菌,冷卻至室溫,調節瓶內氣壓至規定范圍,封口,批檢、質控后?培養液即可使用。?
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