[發(fā)明專利]一種供應(yīng)設(shè)施種植作物鈣元素的生物制劑及其制備方法、應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310307506.2
• 申請(qǐng)日: 2013-07-22
• 公開（公告）號(hào): CN103804067A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳立華;邵孝侯;朱福新;談俊益;毛欣宇;潘小寶;常婷婷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河海大學(xué)
• 主分類號(hào): C05G3/00
• 分類號(hào): C05G3/00
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 李紀(jì)昌

1.一種供應(yīng)設(shè)施種植作物鈣元素的生物制劑，其特征是該制劑中含有0.5×10⁸?cfu?ml^-1以上γ-多聚谷氨酸合成菌株，鈣離子濃度8～15%?w/v；其中所述的γ-多聚谷氨酸合成菌株為解淀粉芽孢桿菌IAE（Bacllus?amyloliquefaciens?IAE），于2013年3月15日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為武漢市武昌珞珈山，菌種保藏號(hào)為CCTCC?NO：M?2013086，簡(jiǎn)稱解淀粉芽孢桿菌CCTCC?NO：M?2013086。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種供應(yīng)設(shè)施種植作物鈣元素的生物制劑，其特征是所述的制劑含有γ-多聚谷氨酸含量為13~18%?w/v，鈣離子含量8~15%?w/v，解淀粉芽孢桿菌CCTCC?NO：M?2013086的濃度≥0.5×10⁸?cfu?ml^-1。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2一種供應(yīng)設(shè)施種植作物鈣元素的生物制劑，其特征在于所述的解淀粉芽孢桿菌CCTCC?NO：M?2013086所用液體培養(yǎng)基配制方法為，以配制1L培養(yǎng)基為例：葡萄糖80g，谷氨酸鈉50g，(NH₄)₂SO₄?8g，NaCl?5g，K₂HPO₄·3H₂O?2g，MnSO₄·7H₂O?0.25g，MnSO₄?H₂O?0.03?g，蒸餾水1000ml，pH值自然，115℃滅菌30min。

4.權(quán)利要求1或2所述一種供應(yīng)設(shè)施種植作物鈣元素的生物制劑在集約化設(shè)施農(nóng)業(yè)種植以及果實(shí)類作物保鮮中的應(yīng)用。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種供應(yīng)設(shè)施種植作物鈣元素的生物制劑的制備方法，其特征在于，按如下步驟實(shí)現(xiàn)：

1）將權(quán)利要求1所述的解淀粉芽孢桿菌CCTCC?NO：M?2013086接種到液體菌種培養(yǎng)基，進(jìn)行液體發(fā)酵生產(chǎn)，其發(fā)酵生產(chǎn)的條件為：搖床震蕩170轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)溫度37℃，培養(yǎng)24小時(shí)，菌落形成單位≥1×10⁹?cfu?ml^-1，獲得菌株種子液；所用的液體的種子培養(yǎng)基的配方為，按照1L培養(yǎng)基配制：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl?10g，自來(lái)水1000ml，pH范圍為7.0-7.5，121℃滅菌20min；

2）將步驟（1）所述的菌株種子按照5%體積百分比接種到液體發(fā)酵培養(yǎng)基，進(jìn)行液體發(fā)酵生產(chǎn)，其發(fā)酵生產(chǎn)的條件為：培養(yǎng)溫度28-35℃，溶氧通氣量范圍為30～100％，150-220rpm，發(fā)酵后期發(fā)酵液該菌株的菌落形成單位≥1×10⁹?cfu?ml^-1；所用的液體的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為，按照1L培養(yǎng)基配制：葡萄糖80g，谷氨酸鈉50g，(NH₄)₂SO₄?8g，NaCl?5g，K₂HPO₄·3H₂O?2g，MnSO₄·7H₂O?0.25g，MnSO₄?H₂O?0.03?g，蒸餾水1000ml，pH值自然，115℃滅菌30min；

3）將氯化鈣或者氨基酸鈣一種或者兩種任意比例混合，按照20%?w/v的量緩慢的加入微生物發(fā)酵液，加入的過(guò)程不斷的快速攪拌避免鈣化合物沉淀，化合物徹底加入后繼續(xù)攪拌1~2小時(shí)讓微生物菌體穩(wěn)定和進(jìn)入休眠狀態(tài)；復(fù)合物在常溫靜置24小時(shí)，灌裝液體，即為一種供應(yīng)設(shè)施種植作物鈣元素的生物制劑。