[發明專利]用于檢測食物腐敗微生物的組合物

無效

• 申請號: 201310306778.0
• 申請日: 2013-07-22
• 公開（公告）號: CN103571829A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 陳才夫
• 申請（專利權）人: 帕爾公司
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/04
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 李瑛

電子提交材料的引入參考

在此將全部引入作為參考的是與此同時提交的并如下標識的計算機可讀核苷酸/氨基酸序列表：日期為2012年7月20日的文件名為“710675序列表”的One8,781Byte?ASCII（文本）。

發明背景

微生物（例如，細菌）可以在制造過程中或制造后引起食物（例如，啤酒）的腐敗。一些微生物可能引起食物腐敗以及幾種不合需要作用中的任何一種或多種，如，例如，令人不愉快的氣味、令人不愉快的味道以及使得食物食用不安全。不能準確且快速地檢測食物腐敗微生物的存在可能增加食物腐敗的風險。引起食物腐敗的微生物的快速且準確檢測的障礙包括，例如，用于檢測微生物的傳統微生物學方法的冗長持續時間。這些傳統方法可能要花7-14天來完成。準確檢測的另一個障礙包括，例如，一些食物腐敗微生物的基因組序列與非食物腐敗微生物的基因組序列相比的相似性。

因此，對用于檢測引起食物腐敗的微生物的改進組合物和方法存在需求。

發明簡述

本發明的一個實施方案提供了由選自SEQ?ID?NOs:1-45的核苷酸序列組成的核酸。

本發明的另一個實施方案提供了包含兩個或更多個核酸的一組核酸，其中兩個或更多個核酸各自由選自SEQ?ID?NOs:1-45的核苷酸序列組成。

本發明的另一個實施方案提供了包含一組核酸的試驗試劑盒，其中那組核酸選自（a）SEQ?ID?NOs:1-3；（b）SEQ?ID?NOs:4-6；（c）SEQ?ID?NOs:7-9；（d）SEQ?ID?NOs:10-12；（e）SEQ?ID?NOs:13-15；（f）SEQ?ID?NOs:16-18；（g）SEQ?ID?NOs:19-21；（h）SEQ?ID?NOs:22、24和27；（i）SEQ?ID?NOs:22、25和27；（j）SEQ?ID?NOs:23、26和27；（k）SEQ?ID?NOs:28-30；（l）SEQ?ID?NOs:31-33；（m）SEQ?ID?NOs:34-36；（n）SEQ?ID?NOs:37-39；（o）SEQ?ID?NOs:40-42；和（p）SEQ?ID?NOs:43-45。

本發明的再另一個實施方案提供了一種檢測食物中一種或多種微生物的存在的方法，該方法包括：（a）獲得至少一種包含從食物分離的微生物核酸的測試樣品；（b）在允許本發明的核酸和微生物核酸之間形成復合物的條件下，使本發明的核酸、一組核酸或包括至少一種本發明的核酸的支持物與至少一種測試樣品接觸；（c）檢測復合物；和，任選地，（d）將至少一種測試樣品中的復合物的量與來自缺乏微生物核酸的陰性樣品中的復合物的量相比較，其中增加量的來自所述至少一種測試樣品的復合物表示一種或多種微生物的存在。

發明詳述

本發明的一個實施方案提供了由選自SEQ?ID?NOs:1-45的核苷酸序列組成的核酸。在一個實施方案中，核酸是分離的或純化的。本發明的核酸提供了正向引物、反向引物和探針，有利地，其可以與微生物核酸特異性地雜交，用于檢測食物中一種或多種微生物的存在。在一些實施方案中，引物和探針與特定屬的微生物的核酸特異性地雜交。在一個特別優選的實施方案中，引物和探針與特定種的微生物的核酸特異性地雜交。

本發明的核酸可以用于檢測食物樣品中一種或多種引起食物腐敗的微生物的存在。在本發明的一個實施方案中，本發明的核酸可以特異性地檢測選自片球菌屬（Pediococcus）、乳桿菌屬（Lactobacillus）、梳狀菌屬（Pectinatus）和巨球形菌屬（Megasphaera）的一個或多個屬的一種或更多種微生物。通過本發明的核酸可以特異性地檢測的微生物的示例性種列于表1中。

本發明的核酸可以特異性地檢測任何類型的微生物核酸。在本發明的一個實施方案中，微生物核酸是DNA。在再另一個實施方案中，本發明的核酸是由與SEQ?ID?NO:1-45中任一個互補的核苷酸序列組成的核酸。與SEQ?ID?NO:1-45任一個互補的核酸可以檢測微生物RNA。