[發明專利]一種二型登革熱病毒NS1蛋白的重鏈單域抗體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201310303381.6
• 申請日: 2013-07-18
• 公開（公告）號: CN103396481A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 王菊芳;王海鷹;法蒂瑪;馬毅;王小寧
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;C12N15/70;G01N33/577
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 宮愛鵬

1.一種二型登革熱病毒NS1蛋白的重鏈單域抗體，其特征在于，該抗體是由框架區和互補決定區組成，其中框架區FR1-FR4的氨基酸序列為：

FR1：QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAAS

或者QVQLVESGGGLVQPGASLRLSCAAS

或者QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS

FR2:LGWFRQAPGKEREFVAA

或者MGWYRQAPGKQRELVAS

FR3:NYADSVKGRFTISRDSAKNTLFLQLNSLKPEDTAVYYC，

或者NYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYC

FR4:WGQGTQVTVSS

互補決定區CDR1-CDR3的氨基酸序列為：

CDR1：GRTFSTST或者RSIFRFYA

CDR2:ISWLGGRT或者ITRGGIT

CDR3：YARRLGVDY或者NRVGPLGSTPRE或者YARRIGRDY。

2.根據權利要求書1所述的重鏈單域抗體，其特征在于，所述的重鏈單域抗體的氨基酸序列如下，編號P2：

QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSTSTLGWFRQAPGKEREFVAAISWLGGRTNYADSVKGRFTISRDSAKNTLFLQLNSLKPEDTAVYYCYARRLGVDY?WGQGTQVTVSS。

3.根據權利要求書1所述的重鏈單域抗體，其特征在于，所述的重鏈單域抗體的氨基酸序列如下，編號P9：

QVQLVESGGGLVQPGASLRLSCAASRSIFRFYAMGWYRQAPGKQRELVAS

ITRGGITNYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCNRVGPLGSTPREWGQGTQVTVSS。

4.根據權利要求書1所述的重鏈單域抗體，其特征在于，所述的重鏈單域抗體的氨基酸序列如下，編號P10：

QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASRSIFRFYAMGWYRQAPGKQRELVASITRGGITNYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYC?YARRIGRDYWGQGTQVTVSS。

5.根據權利要求書1所述的重鏈單域抗體，其特征在于，所述的重鏈單域抗體的氨基酸序列如下，編號P13：

QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSTSTLGWFRQAPGKEREFVAAISWLGGRTNYADSVKGRFTISRDSAKNTLFLQLNSLKPEDTAVYYCNRVGPLGSTPREWGQGTQVTVSS。

6.權利要求1～5任意一項所述抗體的制備方法，其特征在于，采用羊駝非免疫重鏈單域抗體庫，用重組表達的登革熱病毒NS1蛋白通過多輪生物篩選，采用ELISA法挑選得到能特異性結合的噬菌體單克隆，并進行DNA序列測定，然后轉化至大腸桿菌中表達，即得到目標抗體。

7.權利要求1～5任意一項所述抗體的應用，其特征在于，該抗體用于登革熱病毒感染的檢測。