[發(fā)明專利]一種通過流加次黃嘌呤提高腺苷發(fā)酵產(chǎn)量的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310301845.X
• 申請日: 2013-07-18
• 公開（公告）號: CN103409486A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳寧;劉玥;何菊華;徐慶陽;謝希賢;張成林;劉淑云
• 申請（專利權(quán)）人: 天津科技大學
• 主分類號: C12P19/40
• 分類號: C12P19/40;C12R1/125
• 代理公司: 天津佳盟知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12002
• 代理人: 侯力

1.一種通過流加次黃嘌呤提高腺苷發(fā)酵產(chǎn)量的方法，所述方法采用過程中間間歇勻速補加前體物發(fā)酵生產(chǎn)腺苷，發(fā)酵菌株為枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）XGL，具體包括以下過程：

（1）斜面培養(yǎng)：以枯草芽孢桿菌XGL為出發(fā)菌株，接種至活化斜面，28~32?℃培養(yǎng)20~28?h；

（2）種子培養(yǎng)：用接種環(huán)刮取斜面菌種接種至種子培養(yǎng)基，28~33?℃，180~220?rpm培養(yǎng)8~11?h，作為發(fā)酵種子液；

（3）分批發(fā)酵培養(yǎng)：按10~15%的接種量轉(zhuǎn)接至裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，30~34?℃，溶氧維持在10~20%，用NH₃·H₂O調(diào)節(jié)pH控制在6.0~7.0，培養(yǎng)時間50-60?h，在菌體OD_600*20達到1.0~1.5以后，每隔3~6?h間歇勻速流加前體物次黃嘌呤，添加濃度為1~5g/L，共流加6~12次，每次20~50mL。

2.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的方法，其特征是：

（1）斜面培養(yǎng)基成分以g/L計：葡萄糖?1~3，蛋白胨?5~10，牛肉膏?5~10，酵母粉?2~5?，NaCl?1~2.5，瓊脂20~30，pH?7.0~7.2；

（2）種子培養(yǎng)基成分以g/L計：口服葡萄糖?10~20，玉米漿?15~25?mL/L，豆粕水解液5~10mL/L，酵母粉5~10?，味精3~8，蛋白胨?5~10，KH₂PO₄?0.5~1.5，MgSO₄·7H₂O?0.2~0.8，尿素?2~7，黃嘌呤0.01~0.05，組氨酸0.01~0.05，?pH?7.0~7.2；

（3）液體發(fā)酵培養(yǎng)基成分以g/L計：口服葡萄糖?80~120，酵母膏?12~18，味精8~12，K₂HPO₄?1~3，黃嘌呤?0.01~0.05，組氨酸?0.01~0.05，MgSO₄·7H2O?1~5，MnSO₄?0.003~0.006，F(xiàn)eSO₄·7H₂O?0.003~0.006，CaCl₂?1~3?，玉米漿10~20?mL/L，豆粕水解液10~30?mL/L。