[發明專利]霍山石斛的葉綠體基因組及種質鑒定方法有效
| 申請號： | 201310299386.6 | 申請日： | 2013-07-16 |
| 公開（公告）號： | CN103468709A | 公開（公告）日： | 2013-12-25 |
| 發明（設計）人： | 丁小余;牛志韜 | 申請（專利權）人： | 南京師范大學 |
| 主分類號： | C12N15/29 | 分類號： | C12N15/29;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京知識律師事務所 32207 | 代理人： | 盧亞麗 |
| 地址： | 210046 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 霍山 石斛 葉綠體 基因組 種質 鑒定 方法 | ||
【權利要求書】：
1.霍山石斛的葉綠體基因組，其特征在于：其序列如Seq?ID?NO.1所示。
2.根據權利要求1所述的霍山石斛近緣物種的種質鑒定方法，其特征在于：
（1）提取待檢樣品的DNA：液氮充分研磨待檢的新鮮樣品，用CTAB法提取物種DNA；
（2）以Seq?ID?NO.3和4的序列為引物，利用所提取的DNA為模板，進行擴增PCR擴增；得到如Seq?ID?NO.2所示擴增產物的，為霍山石斛。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，PCR反應體系特征為：制備20ulPCR反應體系，在200ulPCR管中加入如下量的物質：Taq酶0.2ul，dNTP1.4ul，Mg2+1.4ul，10×PCR?Buffer2.0ul，引物2uM各2ul，已提取的DNA+水共11ul；
擴增程序條件為：95℃預變性5分鐘，95℃變性45秒，60℃退火1分鐘，68℃延伸4分鐘，變性、退火、延伸三個步驟循環25次，最后再72℃充分延伸7分鐘。
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