[發明專利]一種白藜蘆醇半乳糖苷的制備方法有效
| 申請號： | 201310257340.8 | 申請日： | 2013-06-25 |
| 公開（公告）號： | CN103276030A | 公開（公告）日： | 2013-09-04 |
| 發明（設計）人： | 盧麗麗;肖敏;郭玉川 | 申請（專利權）人： | 山東大學 |
| 主分類號： | C12P19/44 | 分類號： | C12P19/44 |
| 代理公司： | 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219 | 代理人： | 朱家富 |
| 地址： | 250100 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 藜蘆 半乳糖 制備 方法 | ||
1.一種白藜蘆醇半乳糖苷的制備方法，包括如下步驟：
（1）采用磷酸緩沖液配制乳糖濃度為0.1M～0.3M，丙酮配制的白藜蘆醇濃度為0.05M～0.2M，氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示的β-半乳糖苷酶添加量為2μg～10μg/mL的反應體系；
（2）將步驟（1）制得反應體系于37～45℃水浴中反應20～60分鐘，煮沸終止反應，10000～12000轉/分鐘離心20分鐘，取上清液；
（3）將步驟（2）制得的上清液，經分離、干燥后，制得白藜蘆醇半乳糖苷。
2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中的磷酸緩沖液為濃度10～100mM、pH6～8的磷酸鉀緩沖溶液；根據本發明進一步優選的，所述步驟（1）中的緩沖液為50mM、pH7.0的磷酸鉀緩沖液。
3.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（2）中的反應條件為45℃水浴反應45分鐘。
4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（2）中的煮沸終止反應條件為100℃煮沸5分鐘。
5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（3）中的分離采用制備型薄層層析板分離。
6.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（3）中的干燥為冷凍干燥。
7.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（3）中還包括分離時的薄層層析檢測、合并遷移距離相同的產物的步驟。
8.如權利要求7所述的制備方法，其特征在于，上述薄層層析檢測的步驟如下：
薄層層析板點樣后在展層劑中展開，霧噴顯色劑后，于120℃烘烤5分鐘使糖斑點顯色。
9.如權利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述展層劑由乙腈和水按體積比85：15混合配制；顯色劑是體積百分比為20%的硫酸和濃度為0.5wt%的3,5-二羥基甲苯的溶液。
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