[發明專利]一種抗腫瘤靶向復合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201310256984.5
• 申請日: 2013-06-25
• 公開（公告）號: CN103288968A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發明（設計）人: 郭占云;王曉敏;何勝祥
• 申請（專利權）人: 上海同科生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;A61K38/16;A61P35/00
• 代理公司: 北京萬科園知識產權代理有限責任公司 11230
• 代理人: 劉俊玲;張亞軍

1.一種抗腫瘤靶向復合物，它是蝎氯毒素CTX和蛙卵核糖核酸酶Onc通過二硫鍵交聯得到的化學交聯復合物CTX-Onc。

2.權利要求1所述的復合物，其特征在于：所述的CTX是基于大腸桿菌重組表達及體外酶促成熟策略制備得到的成熟CTX，化學合成的6×His-CTX的核苷酸序列與Seq?ID?NO.1相同，且氨基酸序列與Seq?ID?NO.2相同。

3.權利要求1所述的復合物，其特征在于：所述的Onc是基于大腸桿菌重組表達及體外酶促成熟策略制備得到的成熟Onc，化學合成的6×His-Onc的核苷酸序列與Seq?ID?NO.3相同，且氨基酸序列與Seq?ID?NO.4相同。

4.權利要求1所述的抗腫瘤靶向復合物的制備方法，其步驟如下：

1）重組制備的成熟CTX與氨基特異性修飾劑SPDP在磷酸緩沖液中按1:1的摩爾比于室溫反應1h，所述的磷酸緩沖液含有50mmol/l磷酸鈉和150mmol/l?NaCl，且pH=8.0，然后用TFA調至pH3.0，用HPLC純化，收集修飾的CTX并經質譜鑒定；

2）重組制備的成熟Onc和氨基特異性修飾劑2-Iminothiolane在磷酸緩沖液中按1:20的摩爾比在室溫反應1h，所述的磷酸緩沖液含有50mmol/l磷酸鈉、150mmol/l?NaCl和2.4mmol/l巰基乙醇，且pH=8.0，然后用乙酸調至pH3.0，用Sephadex?G-25分子篩去除過量修飾劑；

3）將步驟1）修飾的CTX和步驟2）修飾的Onc按1:1的摩爾比在磷酸緩沖液中于室溫反應0.5h，所述的磷酸緩沖液含有50mmol/l磷酸鈉和150mmol/l?NaCl，且pH=8.0，然后用乙酸調至pH3.0，用Sephadex?G-25分子篩去除鹽，用10%乙酸洗脫，得到所述的CTX和Onc化學交聯復合物，即所述的抗腫瘤靶向復合物。

5.權利要求1所述的抗腫瘤靶向復合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。