[發(fā)明專利]脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310254150.0
• 申請(qǐng)日: 2013-06-24
• 公開（公告）號(hào): CN103383397A
• 公開（公告）日: 2013-11-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 岳田利;王周利;袁亞宏;蔡瑞;牛晨;郭彩霞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西北農(nóng)林科技大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;A23L3/3526
• 代理公司: 西安恒泰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 61216
• 代理人: 史玫

1.脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球，其特征在于，該脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球是用胺基化磁性微球包被氧化脂環(huán)酸芽孢桿菌特異性抗體而得到的；所述氧化脂環(huán)酸芽孢桿菌特異性抗體的制備方法包括：利用含過硫酸鈉的PBS緩沖液對(duì)脂環(huán)酸芽孢桿菌特異性抗體進(jìn)行氧化處理，之后收集獲得氧化脂環(huán)酸芽孢桿菌特異性抗體。

2.如權(quán)利要求1所述的脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球，其特征在于，采用Sephadex?G-25層析柱收集獲得氧化脂環(huán)酸芽孢桿菌特異性抗體。

3.如權(quán)利要求1所述的脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球，其特征在于，所述氧化脂環(huán)酸芽孢桿菌特異性抗體制備方法還包括：

所述含過硫酸鈉的PBS緩沖液中過硫酸鈉濃度為10mg/mL，PBS緩沖液的濃度為0.1mol/L、pH值為7.4；

所述脂環(huán)酸芽孢桿菌特異性抗體的濃度為（1-3mg）/mL；所述含過硫酸鈉的PBS緩沖液與脂環(huán)酸芽孢桿菌特異性抗體的體積比為（1-3）：1。

4.如權(quán)利要求1所述的脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球，其特征在于，所述胺基化磁性微球的制備方法包括：

（1）80-90℃條件下，F(xiàn)e₃O₄磁核在硅酸鈉溶液中進(jìn)行硅烷化反應(yīng)制備硅烷化磁性微球；所述硅酸鈉溶液的質(zhì)量濃度為4%-5%、PH大于11；

（2）調(diào)節(jié)硅烷化磁性微球的PH呈中性；

（3）80-90℃條件下，將PH呈中性的硅烷化磁性微球、甲醇、3-氨丙基三乙氧基硅烷、去離子水和甘油混合反應(yīng)制備胺基化磁性微球；所述硅烷化磁性微球、甲醇、3-氨丙基三乙氧基硅烷、去離子水和甘油的用量為：

硅烷化磁性微球：????????（1-2g）/毫升

甲醇：???????????????????150體積，

3-氨丙基三乙氧基硅烷：???10體積，

去離子水：???????????????1體積，

甘油：???????????????????150-161體積。

5.如權(quán)利要求4所述的脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球，其特征在于，所述的Fe₃O₄磁核的粒徑為15-25nm、磁性的飽和磁化強(qiáng)度為（40-80emu）/g。

6.如權(quán)利要求4所述的脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球，其特征在于，所述氧化脂環(huán)酸芽孢桿菌特異性抗體的濃度為（1-2mg）/毫升，且每毫升氧化脂環(huán)酸芽孢桿菌特異性抗體用20mg的胺基化磁性微球包被。

7.如權(quán)利要求1至6任一權(quán)利要求所述的脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球，其特征在于，利用封閉液封閉所述的脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球，所述封閉液的組分量為：每100ml濃度為0.01mol/L的PBS緩沖液中含有1-10克BSA和0.05ml?Tween-20。

8.如權(quán)利要求1至6中任一權(quán)利要求所述的脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球用于分離果汁中的脂環(huán)酸芽孢桿菌的應(yīng)用。

9.如權(quán)利要求7所述的脂環(huán)酸芽孢桿菌的免疫磁性微球用于分離果汁中的脂環(huán)酸芽孢桿菌的應(yīng)用。

10.如權(quán)利要求8或9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述果汁的可溶性固形物含量≤15°Brix。