[發(fā)明專利]轉(zhuǎn)基因成分MLPA檢測的探針及制備其長探針的引物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310253831.5
• 申請日: 2013-06-24
• 公開（公告）號: CN103397087A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 凌杏園;陳枝楠;潘廣;章桂明;向才玉;康林;程穎慧;龍海;鄭耘;陳菲
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳出入境檢驗檢疫局動植物檢驗檢疫技術(shù)中心
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44281
• 代理人: 彭家恩;彭愿潔

1.一種轉(zhuǎn)基因成分MLPA檢測的探針，其特征在于：所述探針包括第一組探針至第十一組探針中的至少一組，每組探針中分別含有長探針和短探針，長探針的5’端具有磷酸化修飾；

第一組探針的長探針含有Seq?ID?No.1所示序列，短探針含有Seq?ID?No.2所示序列；

第二組探針的長探針含有Seq?ID?No.3所示序列，短探針含有Seq?ID?No.4所示序列；

第三組探針的長探針含有Seq?ID?No.5所示序列，短探針含有Seq?ID?No.6所示序列；

第四組探針的長探針含有Seq?ID?No.7所示序列，短探針含有Seq?ID?No.8所示序列；

第五組探針的長探針含有Seq?ID?No.9所示序列，短探針含有Seq?ID?No.10所示序列；

第六組探針的長探針含有Seq?ID?No.11所示序列，短探針含有Seq?ID?No.12所示序列；

第七組探針的長探針含有Seq?ID?No.13所示序列，短探針含有Seq?ID?No.14所示序列；

第八組探針的長探針含有Seq?ID?No.15所示序列，短探針含有Seq?ID?No.16所示序列；

第九組探針的長探針含有Seq?ID?No.17所示序列，短探針含有Seq?ID?No.18所示序列；

第十組探針的長探針含有Seq?ID?No.19所示序列，短探針含有Seq?ID?No.20所示序列；

第十一組探針的長探針含有Seq?ID?No.21所示序列，短探針含有Seq?ID?No.22所示序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的探針，其特征在于：還包括第十二組探針至第十五組探針中的至少一組，每組探針中分別含有長探針和短探針，長探針的5’端具有磷酸化修飾；

第十二組探針的長探針含有Seq?ID?No.23所示序列，短探針含有Seq?ID?No.24所示序列；

第十三組探針的長探針含有Seq?ID?No.25所示序列，短探針含有Seq?ID?No.26所示序列；

第十四組探針的長探針含有Seq?ID?No.27所示序列，短探針含有Seq?ID?No.28所示序列；

第十五組探針的長探針含有Seq?ID?No.29所示序列，短探針含有Seq?ID?No.30所示序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的探針，其特征在于：所述第一組探針至第十一組探針依序為檢測新霉素-3’-磷酸轉(zhuǎn)移酶基因NPTII、玄參花葉病毒35S外殼蛋白的啟動子FMV35S、β-葡萄糖苷酸酶基因GUS、核酸酶基因barnase、barnase基因特有抑制基因Barstar、胭脂堿合成酶3’終止子NOS、花椰菜花葉病毒35S外殼蛋白的啟動子CaMV35S、5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因CP4-EPSPS、草丁膦乙酰轉(zhuǎn)移酶基因PAT、轉(zhuǎn)Bt63基因抗蟲水稻特異性基因，以及抗蟲蛋白Cry1Ab和CryAc融合基因Cry1Ab/CryAc的探針；所述第十二組探針至第十五組探針依序為檢測油菜磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因PEPC、麥谷醇溶蛋白基因GAG56D、馬鈴薯莖儲存蛋白基因Patatin和水稻植物特有的基因gos9的探針。

4.一種轉(zhuǎn)基因成分的MLPA檢測方法，其特征在于：采用權(quán)利要求1-3任一項所述的探針以受檢樣品的DNA為模板進行雜交。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測方法，其特征在于：還包括采用一對通用引物對雜交后連接起來的長探針和短探針進行PCR擴增，所述通用引物的上游/下游引物分別含有Seq?ID?No.31和Seq?ID?No.32所示序列。