[發明專利]一種制備蟲菌結合物及提取該結合物多糖的方法

無效

• 申請號: 201310248385.9
• 申請日: 2013-06-21
• 公開（公告）號: CN103329733A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 夏西超;丁可;歸改霞;黃川峰;馬瑜紅;薛世鵬;趙巖;方家選
• 申請（專利權）人: 夏西超
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04;C08B37/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及到益生真菌的應用，具體涉及一種用益生菌寄生蜈蚣制備蟲菌結合物及提取該結合物多糖的方法。

背景技術

蜈蚣在我國大江南北均有分布，傳統醫學將蜈蚣用于疾病的預防和治療已有兩千余年歷史，藥用始見于《神農本草經》。蜈蚣頭部有一對顎足內含有毒腺能夠分泌毒液，這些毒液一方面在捕食時通過毒顎刺入并把毒液注入被捕食動物體內，使之麻痹甚至死亡，另一方面這些毒液有助于增強動物防御能力。然而，這些毒液應用于醫學研究后發現：這些毒液具有中樞抑制及抗驚厥，改善微循環，防止心肌損傷，降低血黏度，促進胃腸運動和消化酶分泌，抗衰老等作用。蜈蚣取毒隨之成了大家關心的話題，早期對蜈蚣取毒都是采用剪取蜈蚣的鰲足，然后研碎，用水或緩沖液提取，這些提取物僅能說是蜈蚣顎足的提取液，其純度不高。隨后，人們采用電刺激方法進行取毒，此法可以多次進行毒素提取，且純度相對較高。但經多次刺激后動物免疫能力下降，導致大量死亡現象，致使大量動物尸體需要處理。這些蟲體作為中藥毒素使用其標準含量缺乏，動物尸體的深層次開發和利用成為迫切需要解決問題。益生真菌寄生蟲體，轉化蟲體物質組成，產生的有益物質已多有報道，而且應用于臨床實踐，如家蠶幼蟲制備僵蠶，蝙蝠蛾幼蟲形成的冬蟲夏草，蟬幼蟲形成蟬花。這些都實現了蟲菌之間結合，在此過程這些益生真菌分解蟲體后產生多糖類物質，該物質對于增強人體免疫功能具有重要意義。由此，本發明為蜈蚣取毒后蟲體處理提供一個有效處理方法，該方法能夠增加蟲體多糖含量。

發明內容

本發明目的在于克服現有技術存在的缺點和不足，提供一種用益生菌寄生蜈蚣制備蟲菌結合物及提取該結合物多糖的方法。該結合產物能夠產生大量多糖類物質，實現電刺激后蜈蚣蟲體的開發利用，提高多糖含量，有助于提高蟲體的經濟價值。

本發明的目的是這樣實現的：

本發明所述用益生菌寄生蜈蚣制備蟲菌結合物的方法為：

(1)、冬蟲夏草菌的培養：將冬蟲夏草菌用牙簽挑取，放入PDY液體培養基活化，制備孢子，搜集孢子，配置菌液；

(2)、結合物的制備：將菌液和蜈蚣蟲體數按照5～60ml∶200～300條的比例，用噴壺將菌液均勻噴灑在蟲體表面或者蟲體浸泡在菌液中1～3分鐘后，放置在15～25℃的環境中，培養7～15天，蟲體3天后出現開始變黑，5天后菌絲開始白色菌絲體，7天后布滿蟲體，10天取出蟲體，自然干燥，即得蜈蚣和冬蟲夏草菌結合產物；進行多糖測定。

本發明所述蟲菌結合物多糖的提取方法包括以下步驟：

(1)、溶解：取50g干燥的蟲菌結合物的菌粉，按菌粉∶水＝1∶25～35(質量比)加去離子水3L；

(2)、提取：95℃水浴提取2h后，5000r/min，離心8～12min，取上清液，旋轉蒸發濃縮至原體積的1/4；

(3)、洗滌：濃縮后的水提液，邊攪拌邊加入4倍的無水乙醇，充分攪拌后靜置8～12h，5000r/min離心8～12min，棄去上清液，沉淀依次用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌2次，用最小體積的去離子水復溶沉淀，再濃縮，凍干，粉碎，即得蟲體結合物的多糖。

由于本發明采取了上述技術方案，得到的蟲菌結合物能夠產生大量多糖類物質，實現電刺激后蜈蚣蟲體的開發利用，提高多糖含量，有助于提高蟲體的經濟價值。

附圖說明

圖1是本發明所述蟲菌結合物。

具體實施方式

本發明所述用益生菌寄生蜈蚣制備蟲菌結合物的方法為：

(1)、冬蟲夏草菌的培養：將冬蟲夏草菌用牙簽挑取，放入PDY液體培養基活化，制備孢子，搜集孢子，配置菌液；

(2)、結合物的制備：將菌液和蜈蚣蟲體數按照5～60ml∶200～300條的比例，用噴壺將菌液均勻噴灑在蟲體表面或者蟲體浸泡在菌液中1～3分鐘后，放置在15～25℃的環境中，培養7～15天，蟲體3天后出現開始變黑，5天后菌絲開始白色菌絲體，7天后布滿蟲體，10天取出蟲體，自然干燥，即得蜈蚣和冬蟲夏草菌結合產物；進行多糖測定。

上述冬蟲夏草菌可由菌種資源庫購買得到。

本發明所述蟲菌結合物多糖的提取方法包括以下步驟：

(1)、溶解：取50g干燥的蟲菌結合物的菌粉，按菌粉∶水＝1∶25～35(質量比)加去離子水3L；

(2)、提取：95℃水浴提取2h后，5000r/min，離心8～12min，取上清液，旋轉蒸發濃縮至原體積的l/4；