[發明專利]一種抗菌肽的制備方法和應用有效
| 申請號: | 201310245373.0 | 申請日: | 2013-06-19 |
| 公開(公告)號: | CN103468673A | 公開(公告)日: | 2013-12-25 |
| 發明(設計)人: | 凌建群;孟廣榮;姜超;謝雯凡;唐啟慧 | 申請(專利權)人: | 江蘇吉銳生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/11 | 分類號: | C12N15/11;C12N15/70;A01N47/44;A01P1/00;A61K38/10;A61K8/64;A61P31/04;A61Q11/00 |
| 代理公司: | 南京知識律師事務所 32207 | 代理人: | 汪旭東 |
| 地址: | 210036 江蘇省南京市漢中門大*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 抗菌 制備 方法 應用 | ||
1.一種抗菌肽的基因,編碼SEQ?ID?NO.1所述的氨基酸序列的抗菌肽,其特征在于具有如SEQ?ID?NO.2-4任一所述的核苷酸序列。
2.一種抗菌肽的制備方法,其特征在于包括如下步驟:
(1)構建含有如權利要求1所述的核苷酸序列表達系統,包括構建表達載體并將表達載體轉化入宿主細胞,形成可表達抗菌肽的重組細胞;
(2)培養重組細胞,使其表達抗菌肽;
(3)分離純化表達產物,得到具有SEQ?ID?NO.1所述的氨基酸序列的抗菌肽。
3.如權利要求2所述的抗菌肽的制備方法,其特征在于所述表達系統為不含有融合標簽的原核表達系統。
4.如權利要求2所述的抗菌肽的制備方法,其特征在于所述表達系統為含有融合標簽的原核表達系統。
5.如權利要求4所述的抗菌肽的制備方法,其特征在于所述融合標簽為融合蛋白proteinG。
6.如權利要求3-5之一所述抗菌肽的制備方法,其特征在于所述原核表達系統為大腸桿菌表達系統。
7.如權利要求6所述抗菌肽的制備方法,其特征在于所述表達系統為鼠李糖誘導表達系統。
8.如權利要求7所述抗菌肽的制備方法,其特征在于所述表達系統進一步使用IPTG進行誘導表達。
9.如權利要求3所述抗菌肽的制備方法,其特征在于所述分離純化表達產物包括將表達產物通過熱變性去除雜蛋白,再進行超濾,截留分子量為10KD。
10.如權利要求4所述抗菌肽的制備方法,其特征在于所述分離純化表達產物包括將表達產物通過親和純化得到帶有融合蛋白的抗菌肽,再將其酶切產物經過親和純化,收集目的產物。
11.如權利要求2-10之一項所述制備方法制備得到的抗菌肽作為抗菌劑在農業、食品、衛生用品、化妝品、生物農藥、生物飼料添加劑、天然食品防腐劑、動植物抗病基因工程領域中的應用。
12.如權利要求11所述的應用,其特征在于抗菌肽作為抗菌劑在清除農作物農桿菌中的應用。
13.如權利要求2-10之一項所述制備方法制備得到的抗菌肽在制備抗菌藥物中的應用。
14.一種抗菌口腔清潔護理產品,其特征在于包含如權利要求2-10之一項所述方法制備的抗菌肽。
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