[發明專利]一種利用DNA熔解溫度分析水稻稻瘟病抗性基因的功能標記有效
| 申請號： | 201310238656.2 | 申請日： | 2013-06-17 |
| 公開（公告）號： | CN103333886A | 公開（公告）日： | 2013-10-02 |
| 發明（設計）人： | 郭濤;羅文龍;陳志強;王慧;黃翠紅;肖武名;劉永柱;張建國 | 申請（專利權）人： | 華南農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人： | 謝敏楠 |
| 地址： | 510642 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 dna 熔解 溫度 分析 水稻 稻瘟病 抗性 基因 功能 標記 | ||
1.?一種稻瘟病抗性基因功能標記Pik-C/T，其特征在于，所述的Pik-C/T由兩對引物Pik-C/T-out、Pik-C/T-in構成，引物序列如下：
????Pik-C/T-out：正向引物序列（5’-3’）?為SEQ?ID?NO:1；反向引物序列（5’-3’）?SEQ?ID?NO:2，
Pik-C/T-in：正向引物序列（5’-3’）?為SEQ?ID?NO:3；反向引物序列（5’-3’）?為SEQ?ID?NO:4。
2.?一種根據權利要求1所述的區別稻瘟病抗性基因功能標記Pik-C/T的應用，其特征在于，所述的應用為區分稻瘟病抗性基因Pik與稻瘟病感病基因pik。
3.?一種區分稻瘟病抗性基因Pik與稻瘟病感病基因pik的方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1.?以待測基因組DNA為模版，利用根據權利要求1所述的Pik-C/T-out擴增；
S2.?將步驟S1擴增所得的基因組稀釋，并以之為模版，利用根據權利要求1所述的Pik-C/T-in擴增；
S3.?利用儀器檢測步驟S2擴增所獲的DNA的熔解溫度，如果待測DNA的熔解溫度在78.5~79.1℃之間，待測水稻為抗稻瘟病水稻，如果待測DNA的熔解溫度在79.5~80.1℃之間，待測水稻為感稻瘟病水稻。
4.?根據權利要求3所述的區分稻瘟病抗性基因Pik與稻瘟病感病基因pik的方法，其特征在于，步驟S2所述的稀釋為稀釋15-25倍。
5.?根據權利要求3所述的區分稻瘟病抗性基因Pik與稻瘟病感病基因pik的方法，其特征在于，步驟S3所述的儀器為LightScanner?96?分析系統。
6.?根據權利要求3所述的區分稻瘟病抗性基因Pik與稻瘟病感病基因pik的方法，其特征在于，步驟S3所述的溶解溫度曲線為60℃-95℃的熔解曲線。
7.?根據權利要求6所述的區分稻瘟病抗性基因Pik與稻瘟病感病基因pik的方法，其特征在于，步驟S3所述的對比，溶解溫度曲線為75℃-82℃的熔解曲線。
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