[發明專利]一種測定本芴醇含量的高效液相色譜方法

無效

• 申請號: 201310238173.2
• 申請日: 2013-06-17
• 公開（公告）號: CN103353487A
• 公開（公告）日: 2013-10-16
• 發明（設計）人: 彭學東;張梅;趙金召;楊艷麗
• 申請（專利權）人: 張家港威勝生物醫藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種測定本芴醇含量的高效液相色譜方法。

背景技術

瘧疾是一種由瘧原蟲引起的，通過虐蚊傳播，是當今世界發病率最高、危害最重的蚊媒傳染病，主要發生在非洲中部、南亞、東南亞及南美北部的熱帶地區。

自20世紀60年代發現惡性瘧原蟲對抗瘧藥氯喹產生抗藥性以來，迄今，抗藥性惡性瘧原蟲已經遍布全球所有的惡性瘧流行區，且抗性強度不斷增強。瘧原蟲產生抗性的速度遠比新藥研究的速度更快，使得原有傳統的抗瘧藥在臨床應用上受到很大的限制，給瘧疾防治工作帶來新的困難。為了保護新藥，延長新藥的使用壽命，將新藥組成復方是延緩抗藥性產生的有效辦法之一，本芴醇是增效、延緩抗藥性的復方制劑中的重要組成成分。

本芴醇(Lumefantrine)(結構式見附圖1)為黃色結晶性粉末；有苦杏仁臭，無味，分子式為C₃₀H₃₂Cl₃NO，化學名為a-(二正丁氨基甲基)-2，7-二氯-9-(對氯苯亞甲基)-4-芴甲醇，臨床上主要用于惡性瘧疾，尤其適用于抗氯喹惡性瘧疾治療的藥物。其標準收藏與中國藥典2010版二部，其含量測定方法為滴定法，不足以滿足樣品分析和質量控制的要求，而高效液相色譜法測定本芴醇含量的方法鮮有報道。本試驗采用反向高效液相色譜法對本芴醇含量測定方法進行研究，方法中本芴醇濃度與峰面積線性關系中，本芴醇的濃度范圍最小可至0.5μg/ml，最大可至50μg/ml，線性關系中濃度范圍較大；該方法還具有靈敏度高，準確可靠，分離效果好，分析簡便快捷等技術特點。

發明內容

本發明的目的是提供一種簡便快捷、分離效果好、靈敏度高、精密度和準確性更高的本芴醇含量檢測方法。為達上述目的，本發明采用了如下技術方案：

本發明選用流動相中甲醇的體積百分比由90％遞減至65％，優選甲醇體積分數為80％；超純水的體積百分比由10％遞增至35％，優選超純水的體積分數為20％；冰醋酸的體積分數百分比由0.2％遞增至1％，優選體積分數為1％；最后用鹽酸鹽調節流動相的pH至4。

本發明HPLC方法中，其特點在于選用上述的流動相，按上述流動相所得本芴醇樣品圖譜有較好的峰形(圖譜見附圖2)和分離效果。

本發明HPLC分析方法進樣量為5μl，利用標準品溶液多次進樣來進行進樣精密度試驗，進樣次數為6次，RSD值為0.01％，進樣精密度非常好。

附圖說明

圖1為本芴醇結構式。

圖2為本發明本芴醇HPLC檢測圖譜。

圖3為本芴醇標樣濃度與峰面積線性關系。

圖4為本芴醇室內放置不同時間吸光度的變化。

圖5為本芴醇檢測波長掃描圖譜。

具體實施方式

在下面的實施例中進一步說明本發明的詳細分析方法，但本發明并不局限于下述詳細分析方法。

實施例1

本芴醇含量測定的高效液相色譜方法-1

色譜條件：采用美國Agilent-1260高效液相色譜儀，Chemstation?Edition色譜工作站

色譜柱：Thermo?BDS-C18(150mm×4.6mm，5μm)

流動相：甲醇∶水∶冰醋酸＝80∶20∶1(體積比)(pH＝4)

檢測溫度：30℃

檢測器：紫外檢測器

檢測波長：264nm

真空泵：SHB-III循環水式真空泵

電子天平：梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司提供，規格為十萬分之一

流動相的制備：流動相按照甲醇∶水∶冰醋酸＝80∶20∶1(體積比)(pH＝4)混合，0.2μm孔徑過濾器過濾，SCQ-250W超聲波超聲脫氣。

采用外標法，需要分別對標準品和待測樣品溶液進行測定。

標準品溶液制備：精密稱取25mg本芴醇標準品，置于50ml容量瓶中，加少量流動相超聲30min使樣品完全溶解后再用流動相稀釋定容至刻度線，作為儲備液，再精密量取儲備液1ml，置于10ml的容量瓶中，加流動相稀釋定容至刻度。

待測樣品制備：精密稱取與標準品同等重量的待測樣品，置于50ml容量瓶中，加少量流動相超聲30min使樣品完全溶解后再用流動相稀釋定容至刻度線。再精密量取1ml溶液，置于10ml的容量瓶中，加流動相稀釋定容至刻度。

根據含量計算公式：

帶入數據即可得到本芴醇含量。

以上標準品與待測樣品均配制6份，絕對誤差不超過0.1％。

實施例2