[發明專利]一種肽醛的制備方法

有效

• 申請號: 201310222464.2
• 申請日: 2013-06-06
• 公開（公告）號: CN103304661A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發明（設計）人: 張文治;劉建;馬亞平;袁建成
• 申請（專利權）人: 深圳翰宇藥業股份有限公司
• 主分類號: C07K14/81
• 分類號: C07K14/81;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 北京萬慧達知識產權代理有限公司 11111
• 代理人: 段家榮;段曉玲

技術領域

本發明涉及藥物合成技術領域，具體涉及一種肽醛的制備方法。

背景技術

肽醛是指C端為醛基的多肽類似物，主要作為絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶以及金屬蛋白酶等四類蛋白水解酶的抑制劑。對于絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶，肽醛通過與絲氨酸或半胱氨酸殘基活性位點結合形成半縮醛或半硫縮醛，發揮蛋白酶抑制作用。對于天冬氨酸和金屬蛋白酶，肽醛與其鍵合形成水合物來達到抑制作用。上述肽醛的蛋白酶抑制作用都是通過與蛋白酶活性位點形成穩定的類四面體結構，從而阻止了蛋白底物與酶的結合。隨著人們對藥物研究的表明，含有氨基醛的多肽在很多疾病中表現出很好的生理作用，因此發展低成本、高收率、易操作的合成氨基醛的方法有著十分重要的經濟價值。

醛基作為一類特殊的化學官能團，在有機化學反應中扮演者重要的角色。基于醛自身的化學特性，一方面醛基不穩定，很容易被氧化成羧基或者被還原成醇羥基，另一方面醛基在酸性或堿性條件下都容易發生縮合反應，導致醛的合成在化學合成工藝中一直是個難點。

目前肽醛的制備方法主要分為液相法和固相法兩類。

（1）液相法。主要有還原法和氧化法制得肽醛。此類方法主要參見以下文獻：J.Med.Chem.,1998,41,4301-4308；J.Med.Chem.,1998，41，2786-2805等。液相法存在的主要問題是中間產物分離麻煩，制備周期長，由于醛基的不穩定帶來的后處理困難等。

（2）固相法。相對于液相法，固相法存在制備簡便、周期短的優勢，更符合快速制備肽醛的要求。固相法目前主要包括還原法、氧化法和水解法。此類方法主要參見以下文獻：Tetrahedron.Lett,1995，36，7871-7874；J.Com.Chem,2000,2,172-181；Tetrahedron.Lett,1997,38,7749-7742；Tetrahedron?Lett，1997，38，7119-7122。當前固相法中存在的主要問題是缺乏合適的連接臂將氨基醛固載化到固相載體上，反應條件較苛刻、易消旋，產率低。

中國專利CN?102329372A采用了一種新的連接臂二乙醇胺，提供了一種簡便、高效的肽醛制備方法，解決了目前肽醛制備工藝繁瑣、周期長、產率低的問題。但其在生產實踐中仍然存在可使用的氨基酸范圍有限以及有緊鄰消旋雜峰存在的缺陷，影響后續純化。

發明內容

本發明針對現有技術中存在的上述缺陷，驚奇地發現二乙醇胺的同系物二丙醇胺和二丁醇胺都可以非常好地作為連接臂，用于肽醛的固相合成。因此，本發明提供了一種操作簡便，氨基酸適用范圍更廣、產率高、低消旋的新型的肽醛的制備方法。

為此，本發明一方面提供了一種肽醛的制備方法，其依次包括制備保護的氨基醛、制備氨基醛連接臂、制備肽醛-樹脂復合物和切割純化得到肽醛純品的步驟。在制備氨基醛連接臂時，所采用的連接臂為二丙醇胺或二丁醇胺。

在本發明的方法中，制備保護的氨基醛步驟中所采用的保護的氨基酸為N-(9-芴甲氧羰酰基)-氨基酸，氨基酸為20種常見氨基酸。針對20種常見的保護氨基酸，在制備保護的氨基醛時，按照其是否有側鏈保護基而采用不同的合成方法。

其中針對側鏈具有保護基的氨基酸而言（以制備Fmoc-Asp(OtBu)-H為例），具體步驟如下：

1、在氬氣保護的條件下，以干燥的四氫呋喃做反應溶劑，-20℃～-10℃的低溫條件下加入Fmoc保護的側鏈具有保護基的氨基酸及1.2eq氯代甲酸異丁酯、1.2eq?DIPEA進行攪拌反應。反應結束后過濾除去不溶物，將濾液直接在-10℃低溫條件下加入2.1eq硼氫化鈉進行還原，得到白色固體。

2、在氬氣的保護條件下，以乙酸乙酯為溶劑，將上一步得到的白色固體溶解完全后，再加入1eq?IBX在40℃反應，最后得到Fmoc保護的側鏈具有保護基的氨基醛。

而針對側鏈不具有保護基的氨基酸而言（以制備Fmoc-Phe-H為例），具體步驟如下：

1、以DCM為溶劑，加入1eq?Fmoc保護的側鏈不具有保護基的氨基酸、1eq?HBTU、3eq?DIPEA，及1.2eq?N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽，反應結束經過洗滌后處理，得到Fmoc保護的weinreb酰胺粗品。