[發明專利]一種比伐盧定的制備方法

無效

• 申請號: 201310210329.6
• 申請日: 2013-05-30
• 公開（公告）號: CN103319570A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 宓鵬程;劉建;馬亞平;袁建成
• 申請（專利權）人: 深圳翰宇藥業股份有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司 11285
• 代理人: 張廣育;姜建成

1.一種比伐盧定的制備方法，包括以下步驟：

1)選擇合適的固相載體；

2)制得Fmoc-Leu-固相載體；

3)脫除Fmoc保護后以1-3倍的投料比加入相應氨基酸進行偶聯，從而依次完成Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH的偶聯；

4)脫除Fmoc保護后以4-8倍的投料比加入Fmoc-Gly-OH進行偶聯，重復偶聯4次；

5)脫除Fmoc保護后以1-3倍的投料比加入相應氨基酸進行偶聯，從而依次完成Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-D-Phe-OH的偶聯，得到比伐盧定樹脂；

6)用裂解試劑將比伐盧定從比伐盧定樹脂上裂解下來，得到粗肽；

7)所述粗肽經過純化，轉鹽，最終得到精制比伐盧定。

2.權利要求1的方法，其中步驟1)中所述的固相載體為Wang樹脂。

3.權利要求1或2的方法，其中步驟4)中Fmoc-Gly-OH的偶聯體系選自DIC/HOBt、HATU/HOAt/DIPEA、PyBOP/HOBt/DIPEA中的一種。

4.權利要求1-3任一項的方法，其中步驟4)中Fmoc-Gly-OH的偶聯反應時間為10min-30min。

5.權利要求1-3任一項的方法，其中步驟6)中所述的裂解試劑為TFA、TIS和H2O的混合物。

6.權利要求5的方法，其中TFA∶TIS∶H2O＝92∶4∶4(V∶V)。

7.權利要求1-3任一項的方法，其中步驟7)中所述的純化為反相高效液相色譜純化。

8.權利要求7的方法，其中所述反相高效液相色譜的色譜柱為反相C18柱。

9.權利要求1-3任一項的方法，其中步驟7)中所述的轉鹽是轉成三氟乙酸鹽形式。