[發明專利]一種烷基吡喃酮類化合物及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201310209122.7
• 申請日: 2013-05-30
• 公開（公告）號: CN104211670A
• 公開（公告）日: 2014-12-17
• 發明（設計）人: 陳立;鐘萍;夏其文;張其清
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: C07D309/38
• 分類號: C07D309/38;C12P17/06;A61K31/366;A61P35/00;C12R1/885
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

本發明涉及一種烷基吡喃酮類化合物及其制備方法和用途。

背景技術

烷基吡喃酮類化合物(Alkyl?pyrones)是吡喃酮類化合物的一類衍生物，結構特征是含有六元環不飽和內酯，常被報道具有廣泛的生物活性，如細胞毒性作用、神經毒性作用和植物毒性作用等。本發明人研究得知，棘孢木霉(Trichoderma?asperellum)?IBPT-2?(2012年10月30日保藏在武漢大學中國典型培養物保藏中心，保藏編號是：CCTCC?NO：M?2012438)菌絲體內代謝產物的粗提物有較好的癌細胞增殖抑制活性，遂對其活性成分進行研究。研究發現所示烷基吡喃酮類化合物具有抗腫瘤活性，目前尚未見該化合物的化學結構及癌細胞增殖抑制活性的報道，因此市場上也尚未見有與此相關的藥物。

發明內容

本發明的目的在于提供一種烷基吡喃酮類化合物及其制備方法和用途，該化合物具有抑制癌細胞增殖活性。其結構式為：

。

其結構特征是：含有一個α-吡喃酮結構。

本發明還提供了所述化合物的制備方法：發酵培養棘孢木霉(Trichoderma?asperellum)，獲取菌絲體，進行破碎萃取處理后，得到菌絲體內代謝產物粗提物，然后從粗提物中分離純化出該化合物。?

所述棘孢木霉(Trichoderma?asperellum)為棘孢木霉(Trichoderma?asperellum)?IBPT-2，已于2012年10月30日保藏在中國典型培養物保藏中心，地址：中國?武漢?武漢大學，保藏編號是：CCTCC?NO：M?2012438。

本發明還保護了所述的化合物在制備癌細胞增殖抑制劑中的用途。所述癌細胞優選為人淋巴癌細胞RAJI。及該化合物在制備抗腫瘤藥物中的用途。

????本發明的顯著優點：研究所示烷基吡喃酮類化合物屬于活性吡喃酮類化合物，并且含有一個α-吡喃酮結構。所述烷基吡喃酮類化合物具有抗腫瘤活性，目前尚未見該化合物的化學結構及癌細胞增殖抑制活性的報道，因此市場上也尚未見有與此相關的藥物。

具體實施方式

在如下的實施例中所指的化合物的化學結構：

????

實施例1該化合物的發酵生產及分離精制

1發酵生產

生產菌的發酵培養：按培養微生物的常規方法，取棘孢木霉(Trichoderma?asperellum)?(2012年10月30日保藏在武漢大學中國典型培養物保藏中心，保藏編號是：CCTCC?NO：M?2012438)適量，接種到PDA固體斜面培養基上在28℃培養箱中培養4天。

取斜面培養4天的菌株適量，接種到裝有400mL培養液[培養基組成(克/升)：甘露醇20.0，酵母膏3.0，麥芽糖20.0，味精10.0，葡萄糖10.0，KH₂PO₄?0.5，MgSO₄?0.3]的1000?mL錐形瓶中，28℃靜止培養30天后，獲得菌絲體和發酵液。

2?浸膏的獲得

?發酵完成后，用紗布將菌絲體和發酵液分離。用含丙酮與水4:1的溶液浸泡溶解菌絲體細胞壁，超聲輔助破碎，用多層紗布過濾得到菌絲體的丙酮粗提物。菌絲體破碎后得到的丙酮粗提物旋轉蒸發除去丙酮，直至剩下粗提物的水溶液。按體積比為1:2加入乙酸乙酯，連續萃取兩遍，合并后減壓濃縮至干，得到菌絲體內代謝產物的乙酸乙酯浸膏。

3?化合物的分離精制?

該浸膏通過100-200目硅膠拌樣后固體上樣，以石油醚：二氯甲烷：甲醇為洗脫液用減壓硅膠色譜柱梯度洗脫。洗脫液經過活性跟蹤（對人黑色素瘤細胞株A375抑制），得到活性組分D?(二氯甲烷-甲醇v/v?30:1洗脫物)，然后以石油醚：二氯甲烷：甲醇梯度組分為洗脫液，進一步通過加壓硅膠柱層析梯度洗脫，得到的活性亞組分D2(二氯甲烷-甲醇為20:1的洗脫物)通過氯仿-甲醇(v/v?2:1)為溶劑進行Sephadex?LH-20凝膠柱層析，再經過RP-18反相硅膠柱層析以甲醇-水(v/v?3:2)為溶劑洗脫，最后通過半制備液相色譜(1010型ODS-A，10×250?mm，5μm)：分離流速為5?mL.min^-1，流動相為60%乙腈，得到所示化合物(21.3?mg，t_R?17.63min)。