[發明專利]一種脂肪酶高產菌株、其篩選方法及用該菌株發酵生產脂肪酶的方法

有效

• 申請號: 201310204900.3
• 申請日: 2013-05-28
• 公開（公告）號: CN103275898A
• 公開（公告）日: 2013-09-04
• 發明（設計）人: 朱國萍;王寶娟;李全發;姚賀幫;晏蓉;馬文杰;靳明明;曹正宇;王鵬;葛亞東
• 申請（專利權）人: 安徽師范大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;C12N9/20;C12R1/01
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵;馮瓊

1.一種脂肪酶高產菌株，其特征在于，其保藏編號為CCTCC?NO.M2013072。

2.一種如權利要求1所述的脂肪酶高產菌株的篩選方法，其特征在于，取石油或油污在橄欖油液體富集培養液中富集，稀釋后涂布于丁酸篩選培養基培養后，挑取透明圈直徑最大的菌落，經純化即得。

3.根據權利要求2所述的篩選方法，其特征在于，1L所述橄欖油液體富集培養液中包括：(NH₄)₂SO₄?1.0g、NaCl?0.5g、MgSO₄?0.1g、K₂HPO₄?1g、橄欖油0.01L。

4.根據權利要求2所述的篩選方法，其特征在于，所述富集的次數為至少3次。

5.根據權利要求2所述的篩選方法，其特征在于，1L所述丁酸篩選培養基中包括：酵母提取物1.0g、(NH₄)₂SO₄?1.0g、NaCl?0.5g、MgSO₄?0.1g、K₂HPO₄?1g、瓊脂0.15L、三丁酸甘油酯0.01L。

6.一種脂肪酶的發酵生產方法，其特征在于，包括如下步驟：

獲得保藏編號為CCTCC?NO.M2013072的脂肪酶高產菌株的種瓶培養物；

取所述保藏編號為CCTCC?NO.M2013072的脂肪酶高產菌株的種瓶培養物接種于發酵培養基，培養、純化即得。

7.根據權利要求6所述的發酵生產方法，其特征在于，所述培養的條件為在轉速為180轉/分鐘的條件下、30℃培養48h。

8.根據權利要求6所述的發酵生產方法，其特征在于，以體積百分數計，所述接種的接種量為6%。

9.根據權利要求6所述的發酵生產方法，其特征在于，所述保藏編號為CCTCC?NO.M2013072的脂肪酶高產菌株的種瓶培養物的制備方法包括如下步驟：

步驟1：取保藏編號為CCTCC?NO.M2013072的脂肪酶高產菌株，接種于斜面培養基，于30℃培養18～24h，獲得斜面菌種；

步驟2：取所述斜面菌種接入種子培養基中，在轉速為180轉/分鐘的條件下于30℃培養14～18h，即得。

10.根據權利要求6所述的發酵生產方法，其特征在于，1L所述發酵培養基中包括：橄欖油10mL、蔗糖15g、蛋白胨10g、NaCl?10g。