[發(fā)明專利]雷公藤葉總萜在制備抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎藥物中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310204299.8
• 申請(qǐng)日: 2013-05-28
• 公開（公告）號(hào): CN104173413B
• 公開（公告）日: 2020-02-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張東明;侯琦;李創(chuàng)軍;張?zhí)忑R;白金葉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所
• 主分類號(hào): A61K36/37
• 分類號(hào): A61K36/37;A61P19/02;A61P29/00;A61K127/00
• 代理公司: 北京三高永信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11138
• 代理人: 何文彬

本發(fā)明公開了一種具有抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎活性的有效部位，系由雷公藤葉粉碎后用水和/或醇提取，經(jīng)萃取、中性氧化鋁柱層析、大孔吸附樹脂脫色得到的淡黃色油狀物或膠狀物。本發(fā)明所述的有效部位，抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成分為雷公藤葉總萜，總萜有效部位重量百分比在50%以上。有效部位的制備工藝具有方法簡(jiǎn)單，易工業(yè)化生產(chǎn)，試劑溶劑無(wú)毒性，成本低、含量穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及雷公藤葉總萜在制備抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎藥物中的應(yīng)用，屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritiRA)是一種常見的以慢性、對(duì)稱性、侵蝕性關(guān)節(jié)滑膜炎為主要表現(xiàn)的全身性自身免疫性疾病。滑膜炎持久反復(fù)發(fā)作，可導(dǎo)致關(guān)節(jié)內(nèi)軟骨和骨的破壞，關(guān)節(jié)功能障礙，甚至殘廢。其基本病理改變是滑膜炎和血管翳形成血清、組織中多種細(xì)胞因子、抗原抗體和黏附分子等變化，從而破壞骨和軟骨，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)的破壞、畸形和功能喪失。在世界范圍，RA患病率為0.8%，我國(guó)RA患病率為0.3%-0.4%。目前，RA的主要治療手段是病情緩解型抗風(fēng)濕藥物(DMARDs)療法，這類藥物包括免疫抑制劑，如硫唑嘌呤、氯喹、甲氨蝶呤和青霉胺；甾體激素，如地塞米松等；非甾體抗炎藥，如阿司匹林、吲哚美辛、雙氯芬酸等；以及生物制劑，如阿達(dá)木單抗、依那西普、英利昔單抗和戈利木單抗。這些藥物的共同特點(diǎn)是可抑制RA的病理學(xué)過程，如青霉胺可降低患者體內(nèi)T淋巴細(xì)胞水平、抑制巨噬細(xì)胞功能、降低細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-1(IL．1)和類風(fēng)濕因子水平以及阻止膠原交聯(lián)；抗葉酸劑甲氨蝶呤可抑制免疫系統(tǒng)；新型抗體產(chǎn)品阿達(dá)木單抗和依那西普等可抑制人腫瘤壞死因子-α(TNF-α)。但是這些藥物普遍具有不同程度的不良反應(yīng)，如非甾體藥物嚴(yán)重的胃腸反應(yīng)等。為了進(jìn)一步提高藥物療效和降低其毒副作用，抗RA藥物的研發(fā)仍在繼續(xù)。

雷公藤是我國(guó)傳統(tǒng)的抗風(fēng)濕性藥物，臨床上用于治療RA已取得了確切的療效。在目前國(guó)內(nèi)外的藥學(xué)研究中，至今未發(fā)現(xiàn)比雷公藤免疫抑制活性更強(qiáng)的天然藥物。通過對(duì)雷公藤的根皮精制制成的制劑雷公藤多苷片廣泛應(yīng)用于包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎在內(nèi)的多種自身性免疫疾病。其主要通過抗炎、免疫抑制及調(diào)節(jié)作用來(lái)抑制風(fēng)濕。通過考察佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠的相關(guān)指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)雷公藤多苷能顯著減輕大鼠足跖關(guān)節(jié)腫脹度，關(guān)節(jié)炎癥指數(shù)，減輕踝關(guān)節(jié)滑膜病理改變，且能預(yù)防繼發(fā)性病變的出現(xiàn)；雷公藤多苷對(duì)膠原免疫性關(guān)節(jié)炎(CIA)模型大鼠也有抗炎和免疫抑制的作用。但是目前雷公藤藥材（根皮）主要依靠對(duì)野生資源的大量采挖。雖然有種植資源，但是由于生長(zhǎng)周期長(zhǎng)，而且藥用部位為根，生長(zhǎng)6-8年的根才能供藥用，不利于資源的可持續(xù)性利用。本研究組的前期研究表明雷公藤的葉同樣具有與雷公藤根相同的抗炎及免疫抑制活性，且在相同劑量下巴豆油耳炎活性實(shí)驗(yàn)（抑制率63.1%，P<0.001，）活性比雷公藤根(抑制率28%，P<0.001)和陽(yáng)性藥雷公藤多苷片（抑制率29.9%，P<0.01，）略強(qiáng)。雷公藤葉可以每年采收，并且產(chǎn)量大，因此以雷公藤葉為藥材進(jìn)行抗類風(fēng)濕有效部位的研發(fā)，來(lái)源廣泛，價(jià)格便宜，可實(shí)現(xiàn)中藥材資源的可持續(xù)利用，具有重大現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容

以雷公藤葉為藥材，粉碎后經(jīng)提取、分離和精制，制備總萜含量50%以上的有效部位，加入藥劑上允許的賦形劑，制成片劑、膠囊等口服制劑，用于類風(fēng)濕患者。雷公藤葉總萜有效部位提取物對(duì)小鼠巴豆油耳炎、角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠足腫脹、膠原誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)炎和佐劑誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)炎的藥效均優(yōu)于雷公藤多苷片。1.有效部位制備

本發(fā)明提供一種雷公藤葉總萜有效部位的制備方法，該方法容易操作，收率高，能實(shí)現(xiàn)資源的可持續(xù)性利用。為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明的目的，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案得到雷公藤葉總萜有效部位：

1).提取方法：將雷公藤葉粉碎成粗粉，用10倍量的80%乙醇回流提取2次，合并提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇，至無(wú)醇的混懸液，放冷。

2).溶劑萃取：將步驟1）所得的混懸液用體積約為1/2乙酸乙酯萃取3次，萃取液合并，回收乙酸乙酯，殘留物干燥得到深褐色至黑色的粗浸膏。