[發明專利]正品秦艽提取物及正品秦艽和各品種鑒別方法

有效

• 申請號: 201310202550.7
• 申請日: 2013-05-28
• 公開（公告）號: CN103316073A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 曾銳;劉海萍;瞿燕
• 申請（專利權）人: 西南民族大學
• 主分類號: A61K36/51
• 分類號: A61K36/51;A61P29/00;G01N30/02;G01N30/36
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;杜朗宇

技術領域

本發明涉及正品秦艽提取物及正品秦艽和各品種的鑒別方法。

背景技術

秦艽，是一種常用的中藥材，為龍膽科植物秦艽Gentiana?macrophylla?Pall.、麻花秦艽Gentiana?straminea?Maxim.、粗莖秦艽Gentiana?crassicaulis?Duthie?ex?Burk.或小秦艽Gentiana?dahurica?Fisch.的干燥根。其味辛、苦，性平，歸胃、肝、膽經，具有祛風濕、清濕熱、止痹痛、退虛熱的功效。

由于秦艽藥材主要來自野生，生長周期長，價格穩步上漲，過度采挖已使法定正品秦艽藥材供不應求，因此，市場上出現了較多偽品或劣品來替代正品秦艽。而秦艽更被列為國家三級保護植物。目前對正品秦艽的鑒別主要靠專家據其性狀鑒別，或根據藥典中的薄層色譜方法檢測櫟癭酸進行鑒別。

中藥指紋圖譜是一種綜合的，可量化的鑒定手段，它是建立在中藥化學成分系統研究的基礎上，主要用于評價中藥材質量的真實性、優良性和穩定性。中藥為多組分復雜體系，因此評價其質量應采用與之相適應的，能提供豐富鑒別信息的檢測方法，建立中藥指紋圖譜將能較為全面地反映中藥中所含化學成分的種類與數量，進而對藥材質量進行整體描述和評價。

目前還未見使用HPLC指紋圖譜技術對正品秦艽（粗莖秦艽、麻花秦艽、大葉秦艽和小秦艽）的品種鑒別的報道。

同時，目前在使用液相檢測中藥材質量時，多是采用對照品或指紋圖譜進行檢測，其中，采用對照品檢測時，不能充分反映藥材的質量；而采用指紋圖譜時，雖然能夠全面反應藥材質量，但是，也可能因為檢測儀器、流動相、環境條件等多種因素的差異，造成測量的誤差。若能夠提供一種藥材的標準提取物，該提取物中包含了較多的有效成分，且物質基礎明確，那么，將該提取物與指紋圖譜檢測手段聯合使用后，必定能夠避免或降低外界因素帶來的誤差，更能有效反映藥材質量。

發明內容

本發明的目的在于提供一種正品秦艽的標準提取物。本發明的另一目的在于提供正品秦艽的鑒別方法以及正品秦艽中各藥典品種的鑒別方法。

本發明提供了一種正品秦艽提取物，所述提取物采用HPLC檢測所得色譜圖與對照指紋圖譜比較，相似度在0.9以上；其中，對照指紋圖譜中有7個主色譜峰，各色譜峰信息如下：1號峰，相對保留時間0.48±0.01；2號峰，相對保留時間0.52±0.02；3號峰，相對保留時間0.78±0.01；4號峰，相對保留時間0.82±0.01；5號峰，即龍膽苦苷參照峰，相對保留時間1.00；6號峰，相對保留時間1.03±0.01；7號峰，相對保留時間1.52±0.01；

其中，色譜條件如下：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；

檢測波長：240±2nm；

流動相：以乙腈-0.05～1.0%v/v磷酸水溶液梯度洗脫，梯度程序如下：

。

進一步地，對照指紋圖譜中的7個主色譜峰的相對峰面積如下：1號峰，相對峰面積0.02±0.03；2號峰，相對峰面積0.36±0.36；3號峰，相對峰面積0.08±0.14；4號峰，相對峰面積0.08±0.11；5號峰即參照峰，相對峰面積1.00；6號峰，相對峰面積0.03±0.1；7號峰，相對峰面積0.01±0.02。

優選地，所述對照指紋圖譜如圖1所示。

本發明還提供了上述正品秦艽提取物的制備方法，具體操作如下：

取正品秦艽，粉碎后，以50%～80%v/v乙醇提取，合并醇提液；取醇提液，蒸發至無醇味后，剩余物以有機溶劑-水體系萃取，取水層，干燥后即得正品秦艽提取物；有機溶劑選自乙酸乙酯、異丙醇或氯仿。

本發明提供了正品秦艽的鑒別方法，它是采用HPLC指紋圖譜進行檢測的，具體操作步驟如下：

（1）取待測藥材，粉碎后，以50%～80%v/v乙醇提取，合并醇提液；取醇提液，蒸發至無醇味后，剩余物以有機溶劑-水體系萃取，有機溶劑選自乙酸乙酯、異丙醇或氯仿，取水層，制備供試品溶液即可；

（2）取供試品溶液，經高效液相色譜法檢測，即得供試品色譜圖，其中，色譜條件如下：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；

檢測波長：240±2nm；

流動相：以乙腈-0.05～1.0%v/v磷酸水溶液梯度洗脫，梯度程序如下：

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