[發明專利]艾塞那肽的制備方法

有效

• 申請號: 201310201952.5
• 申請日: 2013-05-27
• 公開（公告）號: CN103265630A
• 公開（公告）日: 2013-08-28
• 發明（設計）人: 郭德文;曾德志;王曉莉;文永均
• 申請（專利權）人: 成都圣諾生物制藥有限公司
• 主分類號: C07K14/605
• 分類號: C07K14/605;C07K1/16;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 成都虹橋專利事務所(普通合伙) 51124
• 代理人: 梁鑫

技術領域

本發明屬于多肽藥物制備方法技術領域，特別涉及艾塞那肽的制備方法。

背景技術

艾塞那肽具有以下的結構：

His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-

Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-

Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-

Pro-Pro-Ser-NH₂

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艾塞那肽是人工合成的GLP-1（胰高血糖素樣肽）類似物，由39個氨基酸組成，分子量為4186.6，艾塞那肽是擬腸降血糖素藥，可以模擬葡萄糖依賴性胰島素分泌增強作用和腸降血糖素其他抗高血糖藥作用。

艾塞那肽的氨基酸序列與人類GLP-1部分重疊。艾塞那肽在體外顯示可以結合并活化已知的人類GLP-1受體。這就意味著通過包括cAMP（環磷酸腺苷）和/或其他細胞內信號傳導機制使葡萄糖依賴性胰島素合成及胰島β細胞在體內分泌胰島素增加。在葡萄糖濃度升高的情況下，艾塞那肽可促進胰島素從β細胞中釋放。體內給藥后艾塞那肽模擬GLP-1的某種抗高血糖藥作用。

艾塞那肽注射液通過下列作用減少2型糖尿病患者空腹和餐后血糖濃度，從而改善血糖控制。

艾塞那肽具有以下藥理作用：

1、葡萄糖依賴性胰島素分泌

艾塞那肽注射液對胰腺β細胞對葡萄糖的應答性有急性效應，僅在葡萄糖濃度升高的情況下引起胰島素釋放。當血糖濃度下降并接近正常水平時，胰島素分泌下降。

2、第一相胰島素反應

在健康個體中，胰島素大量分泌發生于靜脈注射（IV）給與葡萄糖后10分鐘內。這種分泌稱為“第一相胰島素反應”，2型糖尿病患者特征性地缺乏這種分泌。缺乏第一相胰島素反應是由于2型糖尿病患者早期β-細胞受損。給與達到治療劑量血漿濃度的艾塞那肽注射液能恢復2型糖尿病患者對靜脈快速注射葡萄糖的第一相胰島素反應。與生理鹽水比較，用艾塞那肽注射液進行治療的2型糖尿病患者的第一相胰島素分泌和第二相胰島素分泌均明顯增加（均ｐ＜0.001）。在t=0min經靜脈快速注射葡萄糖（0.3g/kg30秒）前3h開始持續靜脈注射艾塞那肽注射液或生理鹽水5h，患者接受胰島素靜脈注射6.5h（[t]=-30min時停藥）使血糖濃度達到正常水平。

3、胰高血糖素分泌

對于2型糖尿病患者，艾塞那肽能減少高血糖期間胰高血糖素分泌，降低血清胰高血糖素濃度，使肝葡萄糖輸出量降低，減少胰島素需求。但是，艾塞那肽注射液不會損害對低血糖的正常胰高血糖素反應。

胃排空：艾塞那肽注射液可以減慢胃排空，從而減慢食物中的葡萄糖進入循環中的速率。

4、攝食

給與艾塞那肽可以減少動物和人類的食物攝取。

2型糖尿病患者皮下注射艾塞那肽，達到中位血漿濃度峰值的時間為2.1h；皮下注射劑量為10μg的艾塞那肽注射液，艾塞那肽平均峰濃度(Cmax)為211pg/mL，平均曲線下總面積(AUC0-inf)為1036pg·h/mL；在5～10μg的治療劑量范圍內艾塞那肽的暴露（AUC）按比例增加，但Cmax值增加比相應比例少；在腹部、大腿和手臂等部位皮下注射艾塞那肽注射液后暴露量相似。皮下注射單劑量艾塞那肽注射液，艾塞那肽的平均表觀分布容積為28.3L；非臨床研究顯示艾塞那肽主要通過腎小球濾過及隨后的蛋白水解而消除；在人類，艾塞那肽的平均表觀清除率為9.1L/h，平均終末半衰期為2.4h；艾塞那肽的這些藥物代謝動力學特征是非劑量依賴性的；對大多數人，給藥后約10h艾塞那肽濃度仍可測。

臨床上廣泛用于服用二甲雙胍、磺脲類、噻唑烷二酮類、二甲雙胍和磺脲類聯用、二甲雙胍和噻唑烷二酮類聯用不能有效控制血糖的2型糖尿病患者的輔助治療以改善血糖控制

國內外關于艾塞那肽制備報道很多，其合成原理基本相同，列如中國專利CN200910104990.2和201110043778.7，所報道的制備方法均采用固相合成法，以氨基樹脂為起始原料，以單個Fmoc保護的氨基酸為原料，依次逐個接上氨基酸，然后經過裂解、純化和凍干，獲得艾塞那肽。