[發明專利]一種水稻直鏈淀粉含量控制基因Wx的基因型鑒定引物及鑒定方法有效
| 申請號: | 201310187877.1 | 申請日: | 2013-05-20 |
| 公開(公告)號: | CN103276071A | 公開(公告)日: | 2013-09-04 |
| 發明(設計)人: | 蔡海亞;徐得澤;吳建平;游艾青;周雷;程建平;趙鋒 | 申請(專利權)人: | 湖北省農業科學院糧食作物研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 武漢宇晨專利事務所 42001 | 代理人: | 王敏鋒 |
| 地址: | 430064 湖*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 水稻 直鏈 淀粉 含量 控制 基因 wx 基因型 鑒定 引物 方法 | ||
1.一種水稻直鏈淀粉含量控制基因Wx的基因型鑒定引物,分別為:
WxGF:TACAAATAGCCACCCACA;
WxGR:GGGAAACAAAGAATTATAAACATATATGTACAC;
WxTF:CATCAGGAAGAACATCTGCAAGT;
WxTR:GATCAGCCTAACCAAACA。
2.一種水稻直鏈淀粉含量控制基因Wx的基因型鑒定方法:其步驟如下:
1)水稻DNA的提取:CTAB方法提取水稻DNA;
2)PCR擴增:
PCR反應體系為20μL,含2.0μL?10×Buffer,?10?mmol/L?dNTPs?1.0μL,4條10?μmol/L引物各0.5μL,?5U/μL?Taq酶0.2μL,2.0μL模板DNA,12.8μL?ddH2O;
PCR反應程序:94℃預變性5min;94℃變性1min,58℃退火1min,72℃延伸1min,共35個循環;72℃延伸10min,擴增產物在2%?(w/v)瓊脂糖凝膠中電泳,用凝膠成像儀掃描記錄結果;
所述的4條引物為:
WxGF:TACAAATAGCCACCCACA;
WxGR:GGGAAACAAAGAATTATAAACATATATGTACAC;
WxTF:CATCAGGAAGAACATCTGCAAGT;
WxTR:GATCAGCCTAACCAAACA;
3)結果判斷:
4條引物等量混合擴增待檢測品種基因組DNA,根據擴增條帶類型判斷基因型,In1為G堿基的G型等位基因材料擴增出207bp和387bp?2條條帶,T型等位基因材料擴增出235bp和387bp?2條條帶,GT雜合型則擴增出207bp、235bp和387bp的3條條帶。
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