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[發明專利]一種水稻直鏈淀粉含量控制基因Wx的基因型鑒定引物及鑒定方法有效

專利信息
申請號: 201310187877.1 申請日: 2013-05-20
公開(公告)號: CN103276071A 公開(公告)日: 2013-09-04
發明(設計)人: 蔡海亞;徐得澤;吳建平;游艾青;周雷;程建平;趙鋒 申請(專利權)人: 湖北省農業科學院糧食作物研究所
主分類號: C12Q1/68 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001 代理人: 王敏鋒
地址: 430064 湖*** 國省代碼: 湖北;42
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 水稻 直鏈 淀粉 含量 控制 基因 wx 基因型 鑒定 引物 方法
【權利要求書】:

1.一種水稻直鏈淀粉含量控制基因Wx的基因型鑒定引物,分別為:

WxGF:TACAAATAGCCACCCACA;

WxGR:GGGAAACAAAGAATTATAAACATATATGTACAC;

WxTF:CATCAGGAAGAACATCTGCAAGT;

WxTR:GATCAGCCTAACCAAACA。

2.一種水稻直鏈淀粉含量控制基因Wx的基因型鑒定方法:其步驟如下:

1)水稻DNA的提取:CTAB方法提取水稻DNA;

2)PCR擴增:

PCR反應體系為20μL,含2.0μL?10×Buffer,?10?mmol/L?dNTPs?1.0μL,4條10?μmol/L引物各0.5μL,?5U/μL?Taq酶0.2μL,2.0μL模板DNA,12.8μL?ddH2O;

PCR反應程序:94℃預變性5min;94℃變性1min,58℃退火1min,72℃延伸1min,共35個循環;72℃延伸10min,擴增產物在2%?(w/v)瓊脂糖凝膠中電泳,用凝膠成像儀掃描記錄結果;

所述的4條引物為:

WxGF:TACAAATAGCCACCCACA;

WxGR:GGGAAACAAAGAATTATAAACATATATGTACAC;

WxTF:CATCAGGAAGAACATCTGCAAGT;

WxTR:GATCAGCCTAACCAAACA;

3)結果判斷:

4條引物等量混合擴增待檢測品種基因組DNA,根據擴增條帶類型判斷基因型,In1為G堿基的G型等位基因材料擴增出207bp和387bp?2條條帶,T型等位基因材料擴增出235bp和387bp?2條條帶,GT雜合型則擴增出207bp、235bp和387bp的3條條帶。

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