[發明專利]一種高產蛇孢假殼素類化合物菌株焦曲霉TKYX429及其應用

有效

• 申請號: 201310186483.4
• 申請日: 2013-05-20
• 公開（公告）號: CN103232945A
• 公開（公告）日: 2013-08-07
• 發明（設計）人: 洪葵;楊雪
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P1/02;C12R1/70
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 張火春

?

技術領域

????本發明屬于生物工程領域，具體涉及一種高產蛇孢假殼素類（ophiobolins）化合物菌株焦曲霉TKYX429及其應用。

背景技術

目前發現的蛇孢假殼素類二倍半萜烯化合物有30余種，其基本骨架為C5?-?C8?-?C5駢環，顯示了廣譜的抗菌、抗腫瘤活性。

Ophiobolin?A（蛇孢假殼素A）具有植物細胞毒性，能以非常低的量抑制水稻胚芽鞘和根的生長；對惡性瘧原蟲有輕微抑制；具有抑制Gloeosporium?kaki、?Glomerella?lagenarium、?Corticium?vagam、?Macrosporium?bataticola、Bacillus?agri、?Trichomonasvaginalis、?Trichophyton?interdigitale、Trichophyton?purpureum、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、白蘚菌、毛滴蟲菌等微生物的生長發育以及殺線蟲的作用；能抑制大鼠的脂肪細胞攝取葡萄糖，對癌細胞系A-549和Mel-20的IC₅₀為125nM，P-355為62.5nM，還可抑制鈣調素依賴性的環核苷酸磷酸二酯酶并導致小鼠白血病細胞L1210細胞的凋亡。

Ophiobolin?K（蛇孢假殼素K）也有強殺線蟲(Caenorhabditis?elegans)活性，對其EC₅₀為26mM；同時，Ophiobolin?K與Ophiobolin?G（蛇孢假殼素G）一樣對人結腸癌細胞株Hct-15/Hct-116、人乳腺癌細胞株MDA-MB-231/MCF-7、人肺癌細胞株A549、人白血病細胞K562均有抑制作用并呈較好的量效關系。Ophiobolin?K與6-epi-ophiobolin?G（6位異構蛇孢假殼素G）一樣具有抑制細胞生物膜生成的功能，對癌細胞系P388/ADR的抑制率高于阿霉素，其衍生物Ophiobolin?O（蛇孢假殼素O）對癌細胞系A-549和Mel-20的IC₅₀為125nM，對P-335細胞系的IC₅₀為62.5nM，在體外顯著抑制多種腫瘤細胞生長，對乳腺癌MCF-7?作用最強，在低劑量能增加耐藥MCF-7?細胞（MCF-7/ADR）對阿霉素的敏感性，增敏倍數達到10.5?倍。并且Ophiobolin?K在裸鼠體內能增加阿霉素對多藥耐藥乳腺癌的敏感性。

真菌在固態發酵條件下，模擬微生物的自然生長狀態，能大量合成很多液體發酵難合成的次級代謝產物。J.?Ruiz-Sanchez等人發現，二萜類化合物紫杉醇在固體發酵中的產量比液體發酵產量要高（J.Ruiz-Sanchez,Z.R.Flores-Bustamante,?L.?Dendooven.A?comparative?study?of?Taxol?production?in?liquid?and?solid-state?fermentation?with?Nigrospora?sp.??Afungusisolated?from?Taxus?globosa.?Journal?of?Applied?Microbiology,?2010,?2144-2150），Takuya?Itoh等人發現ophiobolins的產量在固體發酵條件下也高于液體發酵，其最高產率達到了50~100mg/kg（Hong?Wei,?Takuya?Itoh,?Masahiro?Kinoshita.?Cytotoxic?sesterterpenes,?6-epi-ophiobolin?G?and?6-epi-ophiobolin?N,?from?marine?derived?fungus?Emericella?variecolor?GF10.?Tetrahedron?.2004,60:6015–6019）。

發明內容

本發明的首要目的在于提供一種高產蛇孢假殼素類化合物焦曲霉菌株。

本發明的另一目的在于提供上述菌株在制備蛇孢假殼素類化合物中的應用。

本發明的再一目的在于提供利用上述菌株制備蛇孢假殼素類化合物的方法。

本發明的目的通過下述技術方案實現：