[發(fā)明專(zhuān)利]一種測(cè)試抗菌藥物對(duì)病原微生物敏感性的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310156826.2
• 申請(qǐng)日: 2013-05-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103233058A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙羅平;吳明輝;邱瑞寶;朱美霞;戚文榮;張發(fā)明;鄧鋼
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 蘇州麥克威爾生物醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/18
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/18;C12Q1/04
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種微生物藥敏測(cè)試方法，具體地說(shuō)，涉及一種測(cè)試抗菌藥物對(duì)病原微生物敏感性的方法，屬于藥物領(lǐng)域。

背景技術(shù)

隨著新型致病菌的不斷出現(xiàn)，抗菌藥的防治效果越來(lái)越差。并且各種致病菌對(duì)不同的抗菌藥物的敏感性不同，同一細(xì)菌的不同菌株對(duì)不同抗菌藥物的敏感性也有差異。長(zhǎng)期以來(lái)，各種致病菌耐藥性的產(chǎn)生使各種常用抗菌藥物往往失去藥效，以及不能很好的掌握藥物對(duì)細(xì)菌的敏感度。

盡管新型抗菌藥物不斷出現(xiàn)，但常見(jiàn)感染菌的耐藥性也隨之增加。國(guó)內(nèi)耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌（MRSA）及血漿凝固酶陰性的葡萄球菌的檢出率在20%-80%之間，耐萬(wàn)古霉素的腸球菌（VRE）,具有超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的腸桿菌科，耐青霉素的肺炎鏈球菌的檢出率也在增多。因此，有效而合理的抗菌藥物治療更加依賴(lài)準(zhǔn)備及時(shí)的抗菌藥敏試驗(yàn)。

體外抗菌藥物敏感性試驗(yàn)簡(jiǎn)稱(chēng)藥敏試驗(yàn)（AST），是指在體外測(cè)定藥物抑菌或殺菌能力的試驗(yàn)。根據(jù)美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)近期推薦的標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)非苛氧菌（腸桿菌科細(xì)菌、銅綠假單胞菌、和其他非腸科桿菌、葡萄球菌屬細(xì)菌、腸球菌屬細(xì)菌）和苛氧菌（嗜血桿菌屬細(xì)菌、淋病奈瑟菌、肺炎鏈球菌和其他鏈球菌）選擇常規(guī)藥敏試驗(yàn)的首選藥物（A組抗菌藥物）或臨床使用的主要抗菌藥物（B組抗菌藥物）進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。

根據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)的規(guī)定，檢測(cè)細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感性，抗菌藥物分了幾組，A、B、C、U，還有O組等。

A組藥主要是針對(duì)的抗菌藥物，要首選，而且是常規(guī)報(bào)告。對(duì)于B組的抗菌藥物要進(jìn)行首選試驗(yàn)，但是選擇性報(bào)告。所謂選擇性報(bào)告就是當(dāng)A組的同類(lèi)藥物耐藥，或者是病人對(duì)這種藥物過(guò)敏，或者是臨床治療無(wú)效的時(shí)候，就應(yīng)該用B組的藥物，所以我們要選擇性報(bào)告B組藥物。還有一種情況就是對(duì)特定部位的標(biāo)本進(jìn)行B組藥物的報(bào)告，這種特定部分的標(biāo)本主要是腦脊液當(dāng)中的腸桿菌，對(duì)三代頭孢菌素的敏感性，泌尿道的一些分離的菌株，它們對(duì)復(fù)方磺胺的敏感性。再就是多種細(xì)菌感染或者是多部位感染的時(shí)候應(yīng)該選擇性的報(bào)道一些B組的藥物。

C組的藥物主要是指的替代或者是補(bǔ)充性的，不作常規(guī)報(bào)告也是選擇性的報(bào)告，選擇C組藥物報(bào)告主要是在一些基本藥物過(guò)敏或者是這些菌株容易造成局部或者是廣泛流行的這些菌株。還有就是治療少見(jiàn)菌的感染，比如腸道用分離的沙門(mén)菌檢測(cè)它們對(duì)氯霉素的敏感性。

U組的藥屬于泌尿道感染藥物，像呋喃妥因，或者是喹諾酮類(lèi)的藥物，主要用在泌尿道感染。

用藥敏實(shí)驗(yàn)進(jìn)行藥物敏感度的測(cè)定，以便準(zhǔn)確有效的利用藥物進(jìn)行治療。目前，臨床微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的方法主要有紙片擴(kuò)散法，稀釋法（包括瓊脂和肉湯稀釋法），抗菌藥物濃度梯度法（E-test法），和自動(dòng)化儀器等。

紙片擴(kuò)散法是我們現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室最常用的一種方法，因?yàn)樗?jīng)濟(jì)、實(shí)用、簡(jiǎn)便，這是一種定性的試驗(yàn)，通過(guò)鄰近紙片之間抑菌圈的形態(tài)變化我們可以觀察抗菌藥物之間的相互作用。

濃度梯度法需要采取E-test試條，試條的成本比較高，但是這種方法操作比較簡(jiǎn)單，結(jié)果判定也是比較清楚的，是一種定量的方法。

微量液體稀釋法是把抗菌藥物加到了微孔板當(dāng)中，進(jìn)行了不同的稀釋?zhuān)圆僮鞅容^繁瑣，在孔里面生長(zhǎng)的細(xì)菌我們看不出來(lái)是不是有污染菌，因此要判定它是不是有污染菌必須再轉(zhuǎn)種到平板上進(jìn)行判定，這是一種定量的方法，可以直接給出最低抑菌濃度。

瓊脂稀釋法是把抗菌藥物加到了菌制板里，然后把細(xì)菌再接種到平板上，這種方法適合大批量細(xì)菌進(jìn)行藥敏檢測(cè)，能夠進(jìn)行定量檢測(cè)。

現(xiàn)在越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)了先進(jìn)的自動(dòng)化的儀器，如VTTEK、MicroScan和Phoenix，都是可以進(jìn)行細(xì)菌藥敏試驗(yàn)的。它們最大的優(yōu)點(diǎn)就是可重復(fù)，檢測(cè)時(shí)間比較快，避免了手工量讀的錯(cuò)誤，而且還帶有專(zhuān)家分析系統(tǒng)。當(dāng)然儀器方法也離不開(kāi)人工要提前制備細(xì)菌菌懸液，菌懸液制備的純度和濃度會(huì)影響儀器的結(jié)果，由于儀器是需要配套的抗菌藥物板，因此它的耗材比較貴，抗菌藥物組合是由廠家規(guī)定的不能由用戶(hù)隨意更改。對(duì)于臨床相關(guān)的一些苛養(yǎng)的細(xì)菌，還有厭氧菌，部分非發(fā)酵菌儀器方法是不能測(cè)定的。對(duì)一些特殊耐藥機(jī)制或者是低水平耐藥的細(xì)菌，用儀器方法也不能夠檢測(cè)出來(lái)。國(guó)內(nèi)多數(shù)的醫(yī)院還是在使用紙片擴(kuò)散法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明可提高微生物藥敏測(cè)試的操作效率、準(zhǔn)確性和經(jīng)濟(jì)性。可以定量，并且省去了稀釋法的繁瑣操作，比E-test試條更準(zhǔn)確經(jīng)濟(jì)。