[發明專利]一種安來霉素A與B分離方法

有效

• 申請號: 201310135343.4
• 申請日: 2013-04-17
• 公開（公告）號: CN103232530A
• 公開（公告）日: 2013-08-07
• 發明（設計）人: 胡永紅;楊文革;李佼佼;管珺;開玉美;曹崢
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;袁正英

1.一種安來霉素A與B的分離方法，其具體步驟如下：

（1）將安來霉素發酵液抽濾，用蒸餾水沖洗濾餅，收集濾餅；

（2）將濾餅加入到有機溶劑中攪拌均勻后全部轉移到珠磨機中珠磨，收集流出漿液；

（3）將流出漿液通過超濾膜濃縮6～10倍體積后過濾，收集得濾液；

（4）將濾液通過平衡好的大孔吸附樹脂柱進行洗脫：先用鹽溶液洗脫，再用有機溶劑A洗脫，收集得A液，當液相檢測A液在5.0～5.2min無吸收峰時換有機溶劑B洗脫，收集得B液，當液相檢測B液在7.3～7.5min無吸收峰后停止洗脫；

（5）將收集的A液和B液分別濃縮干燥，分別得到安來霉素A和B。

2.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于步驟（1）中加入的蒸餾水與發酵液的體積比為1～2：1。

3.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于步驟（2）中有機溶劑為鹽酸的丙酮水溶液或者是鹽酸的乙醇水溶液，其中有機溶劑中鹽酸的摩爾濃度均為0.04～0.08mol/L，丙酮和乙醇的體積分數均為70%～95%；有機溶劑的加入量為有機溶劑與發酵液的體積比為1～3：1；珠磨條件為：珠磨溫度30～50℃,轉速5000～7000rpm，珠磨時間10～30min。

4.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于步驟（3）中超濾膜的截留分子量為2000～2400Da；超濾過程的壓力為0.04～0.06Mpa；溫度為30～50℃；流速為1.0～2.0mL/s。

5.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于步驟（4）中的大孔吸附樹脂為AB-8、HPD400或HPD500;鹽溶液為NaCl或KCl水溶液，鹽溶液為質量分數0.5%-1.0%；有機溶劑A為甲醇的NaCl水溶液，其中NaCl水溶液的質量分數為0.5%-1.0%，甲醇與NaCl溶液的體積比為5～7:3；有機溶液B為體積分數90%-98%的乙醇或者是鹽酸的甲醇水溶液，其中鹽酸水溶液的摩爾濃度為0.004～0.006mol/L,甲醇與HCl水溶液的體積比為1～3:1。

6.根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于步驟（4）中鹽溶液的用量為2～4柱體積。