[發(fā)明專利]一種開管毛細管電色譜柱的制備方法

有效

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• 申請日: 2013-04-15
• 公開（公告）號: CN103191705A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發(fā)明（設計）人: 陳子林;張娟
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: B01J20/281
• 分類號: B01J20/281;B01J20/28;B01J20/30
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 汪俊鋒

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技術領域

本發(fā)明屬于色譜技術領域，涉及一種開管毛細管電色譜柱的制備方法。

背景技術

毛細管電色譜技術是一種新型的高效、快速的分離技術。它中和了毛細管電泳高效和高效液相色譜法高選擇性的優(yōu)點而發(fā)展起來的，具有分析速度快，柱效高，樣品和溶劑消耗量少等優(yōu)點。毛細管電色譜的核心是毛細管電色譜柱。因此，制備柱效高，分離效果好的電色譜柱是研究的重點。

羥基磷灰石是人體骨骼和牙齒的主要礦物成分。由于它具有良好的生物相容性，骨傳導性和生物活性，被認為是最有前景的生物材料之一。因此，不同形態(tài)的納米結構的羥基磷灰石和雜化復合材料被制備出來并應用在骨組織工程和藥物釋放領域。基于納米結構的羥基磷灰石較大的比表面積，較強的吸附性能和多點作用模式，已成功的應用于色譜分離科學。但是由于羥基磷灰石的不規(guī)整的粒徑和形態(tài)，在微量色譜分離應用較少，因此有必要發(fā)展一種粒徑均勻，形態(tài)可控的羥基磷灰石納米材料的制備方法以應用于微系統(tǒng)分離。

由于羥基磷灰石是一種無機材料，缺少化學反應的活性基團，將其固定于毛細管內壁上用于色譜分離存在困難。本發(fā)明采用多巴胺生物仿生法將羥基磷灰石固定于毛細管內壁用于電色譜分離。利用多巴胺可以在各種有機或無機材料表面聚合形成聚多巴胺，聚多巴胺粘合同時也誘導了納米結構羥基磷灰石晶體的形成，從而使羥基磷灰石固定于毛細管內壁用于電色譜分離。該方法制備過程工藝簡單，易于操作，成本低廉，整個制備過程均在水溶液中進行，對環(huán)境無污染。

發(fā)明內容

本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種毛細管電色譜柱的制備方法。

本發(fā)明的要點在于利用多巴胺在弱堿性條件下可以在各種有機或無機材料表面聚合形成聚多巴胺，聚多巴胺誘導了納米結構羥基磷灰石晶體的形成，使羥基磷灰石固定于毛細管內壁上，基于羥基磷灰石的多點作用模式，將其應用于各種化合物的電色譜分離。

其具體制備過程包括：

（1）???毛細管的預處理：石英毛細管依次采用1M?NaOH沖洗2h，H₂O沖洗半小時，氮氣吹干；

（2）??????配制多巴胺濃度為2?mg/mL的10?mM?Tris-HCl?緩沖溶液（pH=8.5），?振蕩5?min使其預氧化；

（3）??????將步驟（2）所得的多巴胺堿性溶液通過注射泵以0.01?mL/min的流速連續(xù)通入經步驟（1）預處理的毛細管中20h，用水洗滌，氮氣吹干，得到的內壁修飾有聚多巴胺涂層的毛細管；?

（4）??????將1.5倍模擬體液通入步驟（3）所修飾的毛細管中，毛細管兩端封口，放入37℃水浴鍋中孵化1-14天后取出，用水洗滌，得到羥基磷灰石為固定相的開管毛細管電色譜柱。

所述的1.5倍模擬體液即模擬體液中所有離子濃度的1.5倍。

1.5倍模擬體液成分和濃度為：Na⁺,?213.0;?K⁺,?7.5;?Mg²⁺,?2.25;?Ca²⁺,?3.75;?Cl^-,?221.7;?HCO₃^-,?6.3;?HPO₄^2-,?1.5;?SO₄^2-,?0.75；單位均為?mM。

步驟（3）中所得內壁修飾有聚多巴胺涂層的毛細管，可以重復通入步驟（2）所得的多巴胺堿性溶液，洗滌，吹干，得到內壁修飾有多層聚多巴胺涂層的毛細管。

本發(fā)明的操作步驟示意圖如圖1所示。本發(fā)明采用多巴胺生物仿生礦物化法固定羥基磷灰石于毛細管內壁上，從而使羥基磷灰石固定于毛細管內壁用于電色譜分離。該方法制備過程工藝簡單，易于操作，成本低廉，整個制備過程均在水溶液中進行，對環(huán)境無污染。

附圖說明

圖1?為本發(fā)明羥基磷灰石開管電色譜柱的制備過程示意圖。

圖2為采用本發(fā)明電色譜柱所得5種取代苯的電色譜分離圖?其中,?峰1為苯,?峰2為甲苯,?峰3為乙苯,?峰4為正丙苯,?峰5為正丁苯。

具體實施方式

實施例1