[發(fā)明專利]一種表皮組織培養(yǎng)方法、制得的表皮組織培養(yǎng)物及其應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310119790.0
• 申請日: 2013-04-08
• 公開（公告）號: CN104099289A
• 公開（公告）日: 2014-10-15
• 發(fā)明（設計）人: 宇山太郎;吳復躍;大槻忠男;何振東
• 申請（專利權(quán)）人: 瑞田投資有限公司;上海尚瑞生物醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;A61L27/38;A61L27/60
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 張靜

技術(shù)領域

本發(fā)明屬于細胞培養(yǎng)領域，具體涉及一種表皮組織培養(yǎng)方法，該方法獲得的表皮組織培養(yǎng)物以及該表皮組織培養(yǎng)物在皮膚美容領域中的應用。

背景技術(shù)

表皮組織培養(yǎng)物在醫(yī)療和美容領域有著廣泛的應用。例如，從表皮細胞核真皮細胞培養(yǎng)得到的表皮片組織可用于燒傷部位的治療。對于一些疤痕情況也可采用這種治療方法。大面積黑痣切除后，通常也需要貼上培養(yǎng)的表皮組織，治療黑痣而不留疤痕。

決定皮膚顏色最重要的因子是一種被稱為黑色素的色素性物質(zhì)。黑色素的形成是由存在于表皮基底層的黑色素細胞產(chǎn)生的。而后天性色素脫失癥的尋常型白癜風，就是由于黑色素的形成受到了異常的阻礙，或者黑色素細胞消失所引起的。目前，治療白癜風的方法包括激素治療以及光化學療法。但是，這些療法的預后不穩(wěn)定，需要持續(xù)性治療。

除上述治療方法外，也有從其他部位取皮或毛囊進行移植的治療方法。但是，這種療法會造成與治療部位同等面積的皮膚缺損，因此當治療部位面積相對大時就不能進行此類治療了。另外，也有從自體采取黑色素細胞，經(jīng)過體外培養(yǎng)后再注射移植的治療方法。此療法與自體取皮相比，可以進行相對大面積的治療，但是在注射部位造成色素分布不均，大面積治療時要達到色素的均勻分布是非常困難的。

針對上述問題，本發(fā)明提供了一種新的表皮組織培養(yǎng)方法，該方法包括在以表皮角質(zhì)細胞數(shù)量為100的情況下，黑色素細胞數(shù)量在0.01～50之間的細胞數(shù)量比進行培養(yǎng)。出人意料的是，該方法制備得到的表皮組織培養(yǎng)物具有完整的成片狀形狀，在美容和醫(yī)療應用時能夠?qū)崿F(xiàn)大面積的色素均勻分布。

發(fā)明內(nèi)容

白癜風是一種常見多發(fā)的色素性皮膚病，該病以局部或泛發(fā)性色素脫失形成白斑為特征，是一種獲得性的，皮膚色素脫失形成的白色斑片。尋常型白癜風的主要病因為色素異常，所以普遍認為尋常型白癜風的治療不需要表皮角質(zhì)細胞。但是，本發(fā)明的發(fā)明者使用黑色素細胞和表皮角質(zhì)細胞共同培養(yǎng)的混合物，成功地對大面積尋常型白癜風患者進行了移植治療，且術(shù)后效果顯著，色素亦能均勻地再生。

因此，在本發(fā)明的一方面，提供了一種表皮組織培養(yǎng)方法，該方法包括將黑色素細胞和表皮角質(zhì)細胞所組成的培養(yǎng)混合物在以表皮角質(zhì)細胞數(shù)量為100的情況下，黑色素細胞數(shù)量在0.01～50之間的細胞數(shù)量比進行培養(yǎng)。

在本發(fā)明的一個實施方式中，表皮組織培養(yǎng)物的培養(yǎng)時間為10-50天。

在本發(fā)明的一個實施方式中，在沒有使用小鼠等動物來源的異種滋養(yǎng)細胞層的情況下進行培養(yǎng)。

在本發(fā)明的另一方面，提供了一種表皮組織培養(yǎng)物，該表皮組織培養(yǎng)物是通過將黑色素細胞和表皮角質(zhì)細胞所組成的培養(yǎng)混合物在以表皮角質(zhì)細胞數(shù)量為100的情況下，黑色素細胞數(shù)量在0.01～50之間的細胞數(shù)量比進行培養(yǎng)得到的。

在本發(fā)明的一個實施方式中，表皮組織培養(yǎng)過程中使用的黑色素細胞和表皮角質(zhì)細胞是自體獲得的。

在本發(fā)明的一個實施方式中，本發(fā)明方法的培養(yǎng)得到的表皮組織培養(yǎng)物有完整的成片狀的形狀。

在本發(fā)明的一個實施方式中，本發(fā)明方法的培養(yǎng)得到的表皮組織培養(yǎng)物累積有2～10層的細胞層狀態(tài)。

在本發(fā)明的一個實施方式中，本發(fā)明方法的培養(yǎng)得到的表皮組織培養(yǎng)物中的黑色素細胞有樹枝狀結(jié)構(gòu)。

在本發(fā)明的又一方面，提供了一種表皮組織培養(yǎng)物在制備皮膚美容產(chǎn)品中的應用。

在一些實施方式中，本發(fā)明提供了表皮組織培養(yǎng)物在制備美白產(chǎn)品中的應用。在一些實施方式中，本發(fā)明提供了表皮組織培養(yǎng)物在制備白癜風治療產(chǎn)品中的應用。在一些實施方式中，本發(fā)明提供了表皮組織培養(yǎng)物在制備痤瘡治療產(chǎn)品中的應用。在一些實施方式中，本發(fā)明提供了表皮組織培養(yǎng)物在制備燒傷治療產(chǎn)品中的應用。在一些實施方式中，本發(fā)明提供了表皮組織培養(yǎng)物在制備大面積黑痣治療產(chǎn)品中的應用。在一些實施方式中，本發(fā)明提供了表皮組織培養(yǎng)物在制備紋身治療產(chǎn)品中的應用。在一些實施方式中，本發(fā)明提供了表皮組織培養(yǎng)物在制備過度曬傷治療產(chǎn)品中的應用。

本發(fā)明表皮組織培養(yǎng)方法的優(yōu)點包括：

（1）適用于治療大面積的皮膚損傷(例如，尋常型白癜風、過度曬傷、大面積黑痣、燒傷、疤痕、痤瘡、紋身等等)，并能達到色素均勻分布的再生效果；

（2）適用于美白產(chǎn)品，例如適用于考核美白效果時對黑色素細胞進行的藥效評價；

（3）由于所得表皮組織培養(yǎng)物的形態(tài)是皮片狀的，所以進行移植也非常簡易；以及

（4）在優(yōu)選的實施方式中，黑色素細胞和表皮角質(zhì)細胞來源于同一個體，移植后不會有排異反應發(fā)生，預后也良好。