[發明專利]花曲柳懸浮培養體系的建立方法

無效

• 申請號: 201310111904.7
• 申請日: 2013-04-02
• 公開（公告）號: CN104094840A
• 公開（公告）日: 2014-10-15
• 發明（設計）人: 詹亞光;劉孚婧;齊鳳慧;尹靜;曾凡鎖;范桂枝
• 申請（專利權）人: 東北林業大學;詹亞光;劉孚婧
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種花曲柳(Fraxinus?rhynchophylla?Hance.)愈傷組織團塊懸浮體系建立的方法，其特征在于它包括如下步驟：?

（1）外植體制備?

材料消毒：在超凈工作臺上將取下的花曲柳莖段和葉片在75%酒精浸泡25-30s，無菌水沖洗2次，每次5分鐘，置入飽和Ca(ClO)₂水溶液處理8-12min，用無菌水沖洗4-6次，每次5分鐘，無菌濾紙上吸干；?

（2）愈傷組織誘導?

將（1）處理好的花曲柳莖段(或葉片)切割成0.5-1cm(或cm²)左右的小段(或塊)，接入誘導愈傷組織培養基中誘導愈傷組織；?

（3）懸浮培養體系建立?

將（2）獲得的愈傷組織切割成0.5-1cm³，接種到適合懸浮細胞生長的液體培養基中，置于轉速為110-140r/min的搖床上，溫度23-26℃，每天光照16h，培養7-14d繼代一次。?

2.按照權利要求1所述的一種花曲柳愈傷組織團塊懸浮體系建立的方法，其特征在于，步驟（1）中所述的花曲柳外植體為花曲柳休眠芽萌發的莖段和葉片。?

3.按照權利要求1所述的一種花曲柳愈傷組織團塊懸浮體系建立的方法，其特征在于，步驟（2）中所述的愈傷組織誘導培養基為在1升WPM培養基中加入下述的原料及配比制成：?

。

4.按照權利要求1所述的一種花曲柳愈傷組織團塊懸浮體系建立的方法，其特征在于，步驟（3）中所述的懸浮細胞液體培養基為在1升1/2WPM基本培養基中加入下述原料及配比制成：?

蔗糖???????????????????????????????????20-30g?

萘乙酸(a-naphthalene?acetic?acid)??????0.7-1.4mg/L?

N-苯基-N-1,2,3-噻二唑（thidiazuron）???0.03-0.07mg/L?。