[發明專利]歐洲鵝耳櫪的組培快繁方法有效

申請號：	201310110563.1	申請日：	2013-04-01
公開（公告）號：	CN103181325A	公開（公告）日：	2013-07-03
發明（設計）人：	祝遵崚;金建邦;徐惠群;仲秀林	申請（專利權）人：	南京林業大學;江蘇紫藤園藝綠化工程有限公司
主分類號：	A01H4/00	分類號：	A01H4/00
代理公司：	南京君陶專利商標代理有限公司 32215	代理人：	沈根水
地址：	210037 ***	國省代碼：	江蘇;32
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摘要：
搜索關鍵詞：	歐洲鵝耳櫪組培快繁方法
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【權利要求書】：

1.一種歐洲鵝耳櫪的組培快繁方法，其特征是該方法包括如下工藝步驟：

1）選擇生長飽滿的莖尖，表面消毒后接種在含0.5~10.0mg/L?6-芐基氨基嘌呤的WPM基本培養基上進行不定芽誘導培養，培養基中還包含6.5g/L瓊脂粉和30.0g/L蔗糖；

2）待不定芽長出后，剪取1.5~?2.0cm莖尖，在附加0.1~2.0mg/L?的6-芐基氨基嘌呤，0.1~2.0mg/L的激動素，0~0.5mg/L?的吲哚丁酸植物激素的MS基本培養基上進行增殖培養；

3）剪取生長健壯、長3~4cm的單苗進行生根培養，WPM基本培養基大量元素減少1/2，其他元素保持不變，簡稱1/2WPM基本培養基；附加0~1.0?mg/L吲哚丁酸，0~1.0mg/的萘乙酸；培養溫度為25±2℃，pH?5.8~6.0，光照12h/天，光照強度為2000?lx；

4）當單苗根長到3~5cm時，將生根試管苗的瓶口封口膜打開，在培養室散射光下進行開口煉苗，使試管苗逐漸與外界接觸，在1周內將周圍環境濕度保持在70%~80%，逐步提高小苗適應外界環境的能力；5天后取出試管苗洗凈根部的培養物質，移栽到育苗基質中生長，基質由珍珠巖、泥炭土、園土的重量比為2:2:1組成，充分混合后用多菌靈消毒。

2.根據權利要求1所述的歐洲鵝耳櫪的組織培養方法，其特征是：步驟1）中的WPM基本培養基主要包含以下成分：NH₄NO₃?400mg/L、Ca(NO₃)₂·4H₂O?556mg/L、CaCl₂·2H₂O?96mg/L、MgSO₄·7H₂O?370mg/L、KH₂PO_4?170mg/L、K₂SO₄?990mg/L、H₃BO₃?6.2mg/L、MnSO₄·H₂O?17.7mg/L、ZnSO₄·7H₂O?8.6mg/L、NaMoO₄·2H₂O?0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O?0.25mg/L、FeSO₄·7H₂O?27.8mg/L、Na₂-EDTA?37.3mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、煙酸0.5mg/L、鹽酸硫胺素1.0mg/L、鹽酸吡哆醇0.5mg/L；步驟2）中的MS基本培養基中還包含6.0g/L瓊脂粉和30.0g/L的蔗糖；主要包含以下成分：NH₄NO₃?1650mg/L、KNO_3?1900mg/L、MgSO₄·7H₂O?370mg/L、KH₂PO_4?170mg/L、CaCl₂·2H₂O?440?mg/L、KI?0.83mg/L、H₃BO₃?6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O?22.3?mg/L、ZnSO₄·7H₂O?8.6mg/L、NaMoO₄·2H₂O?0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O?0.025mg/L、CoCl₂·6H₂O?0.025mg/L、FeSO₄·7H₂O?27.8mg/L、Na₂-EDTA?37.25mg/L、肌醇?100mg/L、甘氨酸2mg/L、煙酸0.5mg/L、鹽酸吡哆醇0.5mg/L、鹽酸硫胺素0.1?mg/L。

3.根據權利要求1所述的歐洲鵝耳櫪的組織培養方法，其特征是：步驟3）中的1/2WPM基本培養基，主要包含以下成分：NH₄NO₃?200mg/L、Ca(NO₃)₂·4H₂O?278mg/L、CaCl₂·2H₂O?48mg/L、MgSO₄·7H₂O?185mg/L、KH₂PO_4?85mg/L、K₂SO₄?495mg/L、H₃BO₃?6.2mg/L、MnSO₄·H₂O?17.7mg/L、ZnSO₄·7H₂O?8.6mg/L、NaMoO₄·2H₂O?0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O?0.25mg/L、FeSO₄·7H₂O?27.8mg/L、Na₂-EDTA?37.3mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、煙酸0.5mg/L、煙酸硫胺素1.0mg/L、鹽酸吡哆醇0.5mg/L；附加0~1.0?mg/L吲哚丁酸，0~1.0mg/的萘乙酸；還包含6.5g/L瓊脂粉和15.0g/L的蔗糖，PH?5.8~6.0，光照12h/d，光照強度為2000?lx；培養至60天時統計其增殖倍數、平均株高、生根率、平均根數和平均根長；當根長到3~5cm時，將生根試管苗的瓶口封口膜打開，在培養室散射光下進行開口煉苗，使試管苗逐漸與外界接觸，在1周內將周圍環境濕度保持在70%~80%，逐步提高小苗適應外界環境的能力；5天后取出試管苗洗凈根部的培養物質，移栽到育苗基質中生長，基質由珍珠巖、泥炭土、園土2:2:1組成，充分混合后用多菌靈消毒。