[發明專利]紫背天葵葉片一步成苗高效離體繁殖方法

無效

• 申請號: 201310110363.6
• 申請日: 2013-04-01
• 公開（公告）號: CN103202228A
• 公開（公告）日: 2013-07-17
• 發明（設計）人: 邵玲;梁廉;梁廣堅
• 申請（專利權）人: 肇慶學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 劉宇峰

1.一種紫背天葵葉片一步成苗高效離體繁殖方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）培養基準備，包括：配制、分裝、滅菌；

所述培養基的配制是：每升MS基本培養基中添加6-芐氨基嘌呤即6-BA?0.25~0.5?mg、α-萘乙酸即NAA?0.4~0.8?mg、吲哚丁酸即IBA?0.2?mg、卡拉膠7?g、蔗糖30~40?g，混合后培養基的pH調節至6.0；　

所述培養基的分裝是：將配制后的培養基加熱至瓊脂完全溶解，趁熱均勻地分裝于干凈的培養瓶中；　

所述培養基的滅菌是：將加入培養基的培養瓶在121℃、105?Kpa下滅菌15?分鐘，滅菌后冷卻備用；

（2）外植體處理和接種，包括：采用紫背天葵無菌苗葉片為外植體，直接進行無菌接種，即在無菌條件下，將組織培養無菌苗置于無菌工作臺上切取葉片，將葉片接種于準備好的培養基上，無菌密封瓶口；

（3）培養，包括：將接好種的培養瓶移入培養室進行幼苗的誘導與培養，形成健壯的紫背天葵再生苗叢，用于開瓶移栽；

（4）再生植株移栽：不經煉苗，將步驟（3）得到的再生植株直接開瓶移栽至適宜的條件培養。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，所述培養基為：每升MS基本培養基中添加6-BA?0.25~0.5?mg、NAA?0.4~0.8?mg、IBA?0.2?mg、卡拉膠7g、蔗糖30~40g。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟（2）中，采用葉徑為0.8~1.5?cm的紫背天葵無菌苗葉片為外植體，直接進行無菌接種。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中，幼苗的培養條件為：溫度為25±1?℃，光照強度為8~10?μmol.m^-2.s^-1，光照時間為每天10小時，培養時間為70~80天。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟（3）中，所述苗叢開瓶移栽前，以15?μmol.m^-2.s^-1光照強度加強光照10天。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟（4）中，簇生的組織培養苗直接或分散為帶有3~5個植株的叢苗形式進行移栽。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟（4）中，移栽基質采用完全泥炭土，調節基質的pH緩沖范圍在4.0~4.5之間。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟（4）中，移栽基質采用泥炭土:珍珠巖為3:1（V/V）的混合基質，調節基質的pH緩沖范圍在4.0~4.5之間。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟（4）中，移栽后的培養條件為：白天溫度為25℃，晚上溫度為22℃，相對濕度為90%，光照強度15-18μmol.m^-2.s^-1，光照時間為每天12小時。

10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（4）中，移栽后的培養液為自來水或者1/4?MS培養液。