[發(fā)明專利]從紅豆杉枝葉中提取紫杉醇的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310099519.5
• 申請日: 2013-03-26
• 公開（公告）號: CN103172598A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙家凡;王昌全;鄭萬奎
• 申請（專利權(quán)）人: 四川祥光農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07D305/14
• 分類號: C07D305/14
• 代理公司: 成都蓉信三星專利事務(wù)所 51106
• 代理人: 劉克勤;賀元

1.一種從紅豆杉枝葉中提取紫杉醇的方法，包括下列步驟：

1）.?在室溫條件下，將粉碎的1000kg紅豆杉枝葉用5m³甲醇水浸泡10h以上，甲醇水的濃度為70～90%；將浸泡液過濾；

2）.?將步驟1）得到的濾液采用活性炭柱過濾脫色；

3）.?將步驟2）得到的脫色液進(jìn)行減壓濃縮；采用三氯甲烷或二氯甲烷將減壓濃縮得到的產(chǎn)品分4次進(jìn)行萃取，合并萃取液；

4）.?將步驟3）得到的萃取液在60～80℃的溫度條件下進(jìn)行常壓回收溶劑；在溶劑回收后的液體中加入石油醚，使液體脫脂脫蠟、結(jié)晶沉淀，過濾，真空干燥，得初品；

5）.?將步驟4）得到的初品經(jīng)三氯甲烷溶解后加入硅膠柱中除雜，硅膠柱的硅膠重量為200～300kg；采用洗脫劑對硅膠柱中的層析液進(jìn)行梯度洗脫，洗脫劑為二氯甲烷和甲醇的混合液，二者混合體積之比為100：1～2；采用TLC及HPLC檢測洗脫流份中的紫杉醇，當(dāng)檢測到紫杉醇后，收集含有紫杉醇的洗脫流份；將含有紫杉醇的洗脫流份進(jìn)行減壓濃縮，并真空抽干減壓濃縮產(chǎn)品，得紫杉醇含量≥1.5%的粗品；

6）.?將步驟5）得到的粗品攪拌進(jìn)60～80kg的硅膠中，將攪拌好的硅膠裝柱；采用洗脫劑對硅膠柱進(jìn)行梯度洗脫，洗脫劑為二氯甲烷、異丙醇和甲醇的混合液，三者混合體積之比為100：4～6：0.5～2；采用TLC及HPLC檢測洗脫流份中的紫杉醇，當(dāng)檢測到紫杉醇后，收集含有紫杉醇的洗脫流份；將含有紫杉醇的洗脫流份進(jìn)行減壓濃縮并烘干，得紫杉醇含量≥12%的半成品；

7）.?將步驟6）得到的半成品用5～10倍重量的丙酮溶解；在攪拌狀態(tài)下加入石油醚，直至有晶體析出為止，靜置5～10h，過濾，烘干，得紫杉醇含量≥30%的半成品；

8）.?將步驟7）得到的紫杉醇含量≥30%半成品經(jīng)二氯甲烷溶解后加入硅膠柱中除雜，硅膠柱的硅膠重量為30～60kg；采用洗脫劑對硅膠柱中的層析液進(jìn)行梯度洗脫，洗脫劑為二氯甲烷、乙酸乙酯和異丙醇的混合液，三者混合體積之比為100：8～10：2～4；采用TLC及HPLC檢測洗脫流份中的紫杉醇，當(dāng)檢測到紫杉醇后，收集含有紫杉醇的洗脫流份；將含有紫杉醇的洗脫流份進(jìn)行減壓濃縮至干，得紫杉醇含量≥95%的半成品；

9）.?將步驟8）得到的紫杉醇含量≥95%半成品用6～10倍重量的丙酮溶解，將溶解液真空過濾，在濾液中加入正己烷至晶體出現(xiàn)為止，室溫靜置10h以上，真空抽濾，在溫度條件為56℃以下真空烘11～13h，得紫杉醇含量≥99%的成品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述從紅豆杉枝葉中提取紫杉醇的方法，其特征在于：步驟1）的浸泡液過濾濾速為0.8～1.2m³/h，濾時為20～25h。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述從紅豆杉枝葉中提取紫杉醇的方法，其特征在于：步驟2）的活性炭柱直徑為700～900mm；活性炭柱的活性炭重量為50～80kg。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述從紅豆杉枝葉中提取紫杉醇的方法，其特征在于：步驟5）中的溶解液在硅膠柱中的流速為230～280L/h；洗脫劑在硅膠柱中的流速為230～280L/h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述從紅豆杉枝葉中提取紫杉醇的方法，其特征在于：步驟6）中的洗脫劑在硅膠柱中的流速為200～250L/h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述從紅豆杉枝葉中提取紫杉醇的方法，其特征在于：步驟8）中的溶解液在硅膠柱中的流速為自然流速；洗脫劑在硅膠柱中的流速為180～230L/h。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述從紅豆杉枝葉中提取紫杉醇的方法，其特征在于：所述減壓濃縮的溫度條件為70℃以下。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述從紅豆杉枝葉中提取紫杉醇的方法，其特征在于：所述紅豆杉為曼地亞紅豆杉。