[發明專利]乙肝5項化學發光檢測試劑盒及其制備方法

有效

• 申請號: 201310091509.7
• 申請日: 2013-03-21
• 公開（公告）號: CN103163294A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發明（設計）人: 陳巧欽;嚴小莉;蔡雅銓;徐鏡波;楊家麗;張長弓
• 申請（專利權）人: 廈門市波生生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/576
• 分類號: G01N33/576;G01N33/531;G01N33/532;G01N33/535;G01N21/76
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所 35200
• 代理人: 馬應森

技術領域

本發明涉及一種用于乙肝檢測的試劑盒，尤其是涉及一種采用酶標記生物素-鏈霉親和素技術的乙肝5項化學發光檢測試劑盒及其制備方法。

背景技術

乙型肝炎(乙肝)是由乙型肝炎病毒(Hepatitis?B?Virus,HBV)感染引起的一種嚴重危害人們身體健康的傳染病，據WHO報告，全世界HBV攜帶者約3.5億人。我國是乙肝高發區，據統計，我國人群乙肝表面抗原(HBsAg)的檢出率達10.09％，HBsAg攜帶者達1．2億，男性高于女性（10.3%對7.29%），農村高于城市（10.2%對7.9%），總感染率高達35.5%～61.1%，其中慢性肝炎占56%。全球每年有一百萬人死于肝衰或肝癌，乙肝已經成為全球第9位死亡原因。對于乙肝病毒的檢測與預防是我國目前首要任務之一。

乙肝5項，包括乙肝病毒表面抗原（Hepatitis?B?surface?antigen，HBsAg）、乙肝病毒表面抗體（Hepatitis?B?surface?antibody，抗HBs）、乙肝病毒e抗原（Hepatitis?Be?Antigen，HBeAg）、乙肝病毒e抗體（Hepatitis?B?e?Antibody，抗HBe）以及乙肝病毒核心抗體（HepatitisB?core?antibody，抗HBc）是目前最常用的乙肝檢測手段。常用的方法檢測出HBsAg陰性的人群中，有11.0%HBV-DNA呈陽性反應，也就是說，常規的檢測方法可能有11.0%的漏檢率，究其原因主要是由于抗原含量低于現行方法的可檢出水平。另外，傳統的檢測方法只能提供定性結果，最高也只能進行滴度的分析，在臨床使用上有一定的局限性，特別是在療效觀察和疫苗注射后抗體產生情況的觀察上存在著明顯的不足，故需要一種新的既靈敏快捷準確又不太昂貴的方法來填補這一缺陷。因此對于乙肝5項的定量研究變得尤為重要。

目前，國內針對乙肝5項的定量檢測大多采用國外進口試劑盒，價格昂貴，成本花費巨大，而我國人口眾多，對于乙肝5項檢測的需求量很多，長期使用進口試劑盒不僅在經濟上是高額的負擔，也不利于大量的使用。

發明內容

本發明的目的是提供一種采用酶標記生物素-鏈霉親和素技術的乙肝5項化學發光檢測試劑盒及其制備方法。

本發明所述乙肝5項化學發光檢測試劑盒，包括包被的微孔反應板、生物素標記物、堿性磷酸酶標記物、中和試劑、校準品、發光底物液和濃縮清洗液。

所述微孔反應板為包被有鏈霉親和素的微孔板，所述微孔反應板的材料為聚苯乙烯；

所述生物素標記物共有5種生物素標記物，分別為生物素標記的乙肝表面抗體、生物素標記的乙肝表面體原、生物素標記的乙肝e抗體1、生物素標記的乙肝e抗體2和生物素標記的乙肝核心抗原，所述生物素標記的乙肝e抗體1和生物素標記的乙肝e抗體2的分子成份相同，工作濃度不同，所述生物素標記的乙肝e抗體1用于乙肝e抗原檢測，生物素標記的乙肝e抗體2用于乙肝e抗體檢測；

所述堿性磷酸酶標記物共有5種堿性磷酸酶標記物，分別為乙肝表面抗體堿性磷酸酶標記物、乙肝表面抗原堿性磷酸酶標記物，乙肝e抗體堿性磷酸酶標記物1，乙肝e抗體堿性磷酸酶標記物2和乙肝核心抗體堿性磷酸酶標記物，所述堿性磷酸酶標記的乙肝e抗體1和堿性磷酸酶標記的乙肝e抗體2的分子成份相同，工作濃度不同，所述堿性磷酸酶標記的乙肝e抗體1用乙肝e抗原檢測，堿性磷酸酶標記的乙肝e抗體2用于乙肝e抗體檢測；

所述堿性磷酸酶標記物共有5種堿性磷酸酶標記物，分別為乙肝表面抗體堿性磷酸酶標記物、乙肝表面抗原堿性磷酸酶標記物、乙肝e抗體堿性磷酸酶標記物1、乙肝e抗體堿性磷酸酶標記物2和乙肝核心抗體堿性磷酸酶標記物，所述堿性磷酸酶標記的乙肝e抗體1和堿性磷酸酶標記的乙肝e抗體2的分子成份相同，工作濃度不同，所述堿性磷酸酶標記的乙肝e抗體1用于乙肝e抗原檢測，堿性磷酸酶標記的乙肝e抗體2用于乙肝e抗體檢測；

所述中和試劑為中和試劑乙肝e抗原；