[發(fā)明專利]一種杜鵑花屬菌根試管內(nèi)直接誘導和菌根化種苗快繁方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310074451.5
• 申請日: 2013-03-10
• 公開（公告）號: CN103109746A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發(fā)明（設計）人: 顧地周;顧川岳;姜云天;朱俊義;楊麗娟;郭志欣;潘雨;禚玲玲;張學士;王秋爽;付航;倪偉佳
• 申請（專利權）人: 通化師范學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 通化旺維專利商標事務所有限公司 22205
• 代理人: 王偉

技術領域　

本發(fā)明涉及一種植物繁殖技術，即一種杜鵑花屬菌根試管內(nèi)直接誘導和菌根化種苗快繁方法。?

背景技術

在現(xiàn)有技術中，杜鵑花屬植物根系沒有根毛，吸收能力比具有根毛的根系小得多，但自然條件下幾乎所有的杜鵑細根都有EM(Eriocdimyochrriaz，EM)內(nèi)生菌根真菌的寄生，從而克服了杜鵑由于沒有根毛而造成的對水分及營養(yǎng)的吸收困難，改善植株營養(yǎng)狀況，調(diào)節(jié)宿主的代謝活性，增強植株的抗逆性，提高杜鵑的產(chǎn)量，加快移栽苗成活速度，節(jié)約農(nóng)業(yè)生產(chǎn)成本，增加經(jīng)濟產(chǎn)量和效益。因而將杜鵑組培技術和菌根化技術相結合，生產(chǎn)生長勢旺、抗逆能力強的杜鵑苗木是一項很有經(jīng)濟價值的研究項目。在國外，新西蘭已經(jīng)將接種菌根真菌作為促進杜鵑生長、提高肥料利用率、提高產(chǎn)量的一項有效措施。而在國內(nèi)EM真菌的分離和研究幾乎還是一片空白。要生產(chǎn)菌根化苗木的關鍵是選用適宜當?shù)厣鷳B(tài)條件的優(yōu)良菌種用于接種，培育出優(yōu)質(zhì)的菌根化杜鵑種苗，在生產(chǎn)和應用中將產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟效益。

目前，杜鵑屬植物菌根的研究大多集中在菌根菌的分離和鑒定方面，很少達到與植物的共建并利用于栽培生產(chǎn)。杜鵑花屬植物菌根的建立大多采用種苗繁殖后再行菌根真菌侵染等多步驟方式完成，這些方法存在步驟和操作復雜、侵染率等問題。本發(fā)明開展的杜鵑花試管內(nèi)菌根直接誘導和含菌根苗高效快繁的報道國內(nèi)外迄今未見。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對上述不足而提供一種利用植物組織培養(yǎng)技術，以野生杜鵑花根芽的嫩莖在試管內(nèi)開展了直接誘導菌根的研究，旨在直接建立杜鵑花菌根苗快繁體系，為杜鵑花生長發(fā)育和提高品質(zhì)提供基礎保障的杜鵑花屬菌根試管內(nèi)直接誘導和菌根化種苗快繁方法。

本發(fā)明的技術解決方案是：一種杜鵑花屬菌根試管內(nèi)直接誘導和菌根化種苗快繁方法，其步驟如下：

（1）外植體材料的處理：?8月中旬采杜鵑花靠近根部新萌發(fā)的嫩芽，消毒處理后切割成1～2葉1段作為外植體備用；

（2）杜鵑花菌根誘導的培養(yǎng)基為：基本培養(yǎng)基+KT0.50?mg·L^-1+IAA?0.02?mg·L^-1+GA₃0.70?mg·L^-1；添加蔗糖15.00?g·L^-1，瓊脂粉7.00?g·L^-1，調(diào)節(jié)pH?值為5.6；在溫度24±2℃，光照強度1?400?lx條件下培養(yǎng)，光照周期14?h·d^-1；得外植體；所述的基本培養(yǎng)基成分和含量：63?mg·L^-1(NH₄)₂SO₄，180?mg·L^-1KNO₃，220?mg·L^-1CaCl₂·2H₂O，178?mg·L^-1MgSO₄·7H₂O，302?mg·L^-1KH₂PO₄；9.2?mg·L^-1FeSO₄·7H₂O，12.5?mg·L^-1Na₂·EDTA·2H₂O；10.8?mg·L^-1MnSO₄·4H₂O，6.2?mg·L^-1ZnSO₄·7H₂O，4.1?mg·L^-1H₃BO₃，0.15?mg·L^-1KI，0.05?mg·L^-1Na₂MO₄·2H₂O；

（3）將外植體在基本培養(yǎng)基+玉米素ZT2.20?mg·L^-1上培養(yǎng)出細小嫩腋芽，待嫩腋芽長至1.00～2.00?cm時，再將腋芽從葉腋處切下轉(zhuǎn)接到基本培養(yǎng)基+KT0.50?mg·L^-1+IAA?0.02?mg·L^-1+GA₃0.70?mg·L^-1中；培養(yǎng)60?d統(tǒng)計并計算出菌根化苗的誘導率；