[發(fā)明專利]一種海黍子中抗腫瘤多糖組分的提取純化方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310065653.3
• 申請日: 2013-03-02
• 公開（公告）號: CN103087215A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發(fā)明（設計）人: 周革非;馬偉偉;袁平;陳麗紅;邢榮蓮;滕麗
• 申請（專利權）人: 煙臺大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P35/00
• 代理公司: 煙臺雙聯專利事務所(普通合伙) 37225
• 代理人: 矯智蘭

1.一種海黍子中抗腫瘤多糖組分的提取純化方法，其特征在于包括以下步驟：

（一）提取多糖粗品：（1）海黍子清洗去雜、晾干并粉碎，并過100目篩；（2）將粉碎的海黍子粉末用四倍于其質量的90%的乙醇溶液中冷浸一周進行脫脂，室溫晾干；（3）于取脫脂后的海黍子粉末中加入蒸餾水，在低于70℃的恒溫水浴中抽提，取得抽提液；（4）抽提殘渣加入蒸餾水在恒溫水浴中再次抽提，合并抽提液，抽濾得上清液；（5）將上清液旋轉蒸發(fā)至提取液呈黏稠狀態(tài)，向提取液中加入無水乙醇至乙醇體積分數為30%，在4℃溫度環(huán)境中置放4-8h，過濾去除其中的沉淀，于上清液中加入無水乙醇至乙醇體積分數達到總體積的60%，過濾得到的沉淀即為海黍子褐藻硫酸多糖粗品；

（二）多糖粗品提純：（1）海黍子褐藻硫酸多糖粗品去除蛋白質、小分子等雜質，真空冷凍干燥；（2）將所得的凍干粉配成水溶液層析，分別用0.1M、0.5M、1M的Nacl溶液進行洗脫，得到不同硫酸基含量的三個組分S1、S2、S3；（3）對三個組分進行相關含量測定，并對其進行腫瘤抗性實驗，對抗腫瘤活性最強的組分S2進行層析，根據不同分子量段進一步分級，得SKP1、SKP2、SKP3三個組分；（4）對SKP1、SKP2、SKP3三個組分進行抗腫瘤免疫相關的藥理學性質檢測，篩選得出具有極顯著抗腫瘤活性的多糖組分SKP2。

2.如權利要求1所述的一種海黍子中抗腫瘤多糖組分的提取純化方法，其特征在于所述提取多糖粗品過程中，加入的蒸餾水為二十倍至三十倍海黍子粉末的質量。

3.如權利要求1所述的一種海黍子中抗腫瘤多糖組分的提取純化方法，其特征在于所述提取多糖粗品過程中，恒溫水浴的溫度為60-70℃。

4.如權利要求1所述的一種海黍子中抗腫瘤多糖組分的提取純化方法，其特征在于所述提取多糖粗品過程中，抽提時間為4h。

5.如權利要求1所述的一種海黍子中抗腫瘤多糖組分的提取純化方法，其特征在于所述多糖粗品提純過程中，用Sevag法去除蛋白質，用3600Da截留分子量透析法去除小分子等雜質。

6.如權利要求1所述的一種海黍子中抗腫瘤多糖組分的提取純化方法，其特征在于所述多糖粗品提純過程中，凍干粉配成質量分數為1%的水溶液。