[發明專利]盆栽菊花的組織培養快速繁殖方法

無效

• 申請號: 201310062339.X
• 申請日: 2013-02-27
• 公開（公告）號: CN103141384A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發明（設計）人: 曾麗;汪曉沙;林登貴;彭勇政;趙子剛
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 郭國中;牛山

技術領域

本發明涉及一種生物技術領域的組織培養方法，具體地，涉及一種盆栽菊花的組織培養快速繁殖方法。

背景技術

菊花(Chrysanthemum?morifolium)為菊科屬多年生草本植物，原產中國，有3000多年的栽培歷史，是中國的傳統名花，也是世界四大切花之一。菊花品種繁多，花型及花色豐富多彩，觀賞價值極高，是優良的盆花、花壇、花境用花及重要的切花材料。

Chin-Yi?lu(1990)等研究表明菊花‘Royal?Purple’莖尖的芽誘導率最高，成熟莖段的再生能力降低。陳龍清等(1995)研究發現‘日本早小菊’隨繼代次數的增加玻璃化苗現象逐漸加重。葉小曲等(1999)研究表明不同菊花品種在相同組培條件下生長差異大。李辛雷等(2004)發現不同菊花品種、不同外植體對相同激素水平的反應不同，莖段分化率高于葉片，葉片基部分化率高于中上部。呂晉慧等(2005)發現基因型是影響不定芽再生的重要因素，不同品種的外植體適宜再生的培養基不同。毛紅玉等(2005)研究發現地被菊的幼嫩花瓣是誘導愈傷組織的良好材料，花瓣基部組織培養芽的分化率高于中、上部組織。魏星等(2008)發現不同光質對菊花組培苗的形態、生根、色素含量、酶活性和碳氮代謝的影響不同。Han?B.H等(2009)發現不同品種、培養基和外植體的芽誘導效果不同。Snjezana等(2012)發現葉柄是菊花品種‘Palisade?White’組織培養最適宜的外植體。

組織培養是快速繁殖優良品種的重要途徑之一，盡管前人在菊花組培方面已經做了很多工作，但培養過程中內生菌、玻璃化苗和褐變現象的控制，以及不同品種和不同部位誘導培養基的差別等問題仍需要克服，不同菊花品種的組織培養快速繁殖方法不同，因此不同品種仍然需要進一步研究，形成專用的組織培養快速繁殖技術體系。

發明內容

針對現有技術中的缺陷，本發明的目的是提供一種盆栽菊花的組織培養快速繁殖方法。

本發明涉及一種盆栽菊花的組織培養快速繁殖方法，所述繁殖方法包括如下步驟：

步驟一，將滅菌處理后的外植體進行誘導培養，獲得不定芽；

步驟二，將誘導培養出的不定芽進行增殖培養；

步驟三，將增殖培養后的不定芽進行生根培養，得到生根苗；

步驟四，將生根苗煉苗，移栽到基質中培養，獲得再生植株，即可。

優選地，步驟一中，所述滅菌處理包括如下步驟：取菊花嫩莖段水洗，放入飽和洗衣粉溶液中浸泡，再水洗處理后，置于超凈工作臺上，再放入酒精浸泡，無菌水沖洗，消毒處理，無菌水沖洗，干燥，即可。

優選地，步驟一中，所述飽和洗衣粉溶液中的浸泡時間為2～3min；所述酒精的體積分數為70～75％，其浸泡時間為25～30s；所述消毒處理為用質量分數為0.1％的汞進行消毒，其消毒時間為8～10min；所述干燥具體為用無菌濾紙吸干材料表面水分。

優選地，步驟一中，所述誘導培養所使用的培養基為MS基本培養基，所述MS基本培養基含有30g/L的蔗糖、7g/L的瓊脂、2.0mg/L6-BA、0.1mg/L?NAA，所述誘導培養的溫度24～26℃，光照10～15h/d，光照強度2000～3000lx，時間為25～30d。

優選地，步驟二中，所述增殖培養所使用的培養基為MS基本培養基：所述MS基本培養基含有30g/L的蔗糖、7g/L的瓊脂、1.0mg/L6-BA、0.1mg/L?NAA，所述誘導培養的溫度24～26℃，光照10～15h/d，光照強度2000～3000lx，時間為25～30d。

優選地，步驟三中，所述生根培養所使用的培養基為1/2MS基本培養基，所述1/2MS基本培養基含有30g/L的蔗糖，7g/L的瓊脂、0.1mg/L?NAA，所述生根培養的溫度24～26℃，光照10～15h/d，光照強度2000～3000lx，時間為13～16d。

優選地，步驟四中，所述生根苗煉苗的溫度為24～26℃，其時間為2～3d。

優選地，所述外植體為菊花莖段。

優選地，步驟四中，所述移栽基質為河沙。

與現有技術相比，本發明具有如下的有益效果：

(1)本發明采用的方法繁育的盆栽菊花，3個月內不定芽誘導率可達91.7％，增殖系數可達12.1，生根率可達100％，移栽成活率可達98％以上；提高了盆栽菊花繁殖系數，縮短了成苗周期，大大提高了育苗生產能力，本發明具有較強的可實施性與重復性，可為大面積園林應用和工廠化育苗提供有效的方法；