[發明專利]一種快速誘導及繁殖棉花胚性愈傷的方法

無效

• 申請號: 201310059805.9
• 申請日: 2013-02-26
• 公開（公告）號: CN103120127A
• 公開（公告）日: 2013-05-29
• 發明（設計）人: 宋純鵬;王道杰;鄭軍;王宏亮
• 申請（專利權）人: 河南大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 田小伍;楊海霞

1.一種快速誘導及繁殖棉花胚性愈傷的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1）將培養5－8d的棉花無菌苗的下胚軸切割成長度為0.4－0.8cm的片段，然后置于培養基A或培養基B中于25－28℃培養25－30d，每天光照12－16h，光強1500－1800?Lux，獲得愈傷組織；

2）將步驟1）中從培養基A中獲得的愈傷組織依次置于培養基B和C中于25－28℃分別繼續培養25－30d，每天光照12－16h，光強1500－1800?Lux，獲得胚性愈傷；將步驟1）中從培養基B中獲得的愈傷組織直接置于培養基C中于25－28℃繼續培養25－50d，每天光照12－16h，光強1500－1800?Lux，獲得胚性愈傷。

2.如權利要求1所述快速誘導棉花胚性愈傷的方法，其特征在于，所述培養基A由碳源、MSB5培養基、IAA、KT、2,4-D和凝固劑組成；培養基A中的IAA濃度0.05－0.15mg/L，KT濃度0.05－0.15?mg/L，2,4-D濃度0.05－0.15?mg/L。

3.如權利要求1所述快速誘導及繁殖棉花胚性愈傷的方法，其特征在于，所述培養基B由碳源、MSB5培養基、IAA、KT、2,4-D和凝固劑組成；培養基B中的IAA濃度0.05－0.15mg/L，KT濃度0.01－0.10?mg/L，2,4-D濃度0.01－0.10?mg/L。

4.如權利要求1所述快速誘導及繁殖棉花胚性愈傷的方法，其特征在于，所述培養基C由碳源、MSB5培養基、IAA、KT、2,4-D和凝固劑組成；培養基C中的IAA濃度0.05－0.15mg/L，KT濃度0.01－0.10?mg/L，2,4-D濃度0.01－0.10?mg/L。

5.如權利要求1所述快速誘導及繁殖棉花胚性愈傷的方法，其特征在于，將步驟2）獲得的胚性愈傷先置于培養基D中培養于25－28℃培養15－25d，每天光照12－16h，光強1500－1800?Lux；若不出現分化現象，則繼續置于培養基D中培養，每15－20d為一個繼代周期；若出現分化現象，則置于培養基E中于25－28℃繼續培養15－25d，每天光照12－16h，光強1500－1800?Lux。

6.如權利要求5所述快速誘導及繁殖棉花胚性愈傷的方法，其特征在于，所述培養基D由碳源、MSB5培養基、IAA、6-BA和Phytagel組成；培養基D中的IAA濃度0.001－0.01?mg/L，6-BA濃度0.001－0.01?mg/L，Phytagel濃度2.0－3.0g/L。

7.如權利要求5所述快速誘導及繁殖棉花胚性愈傷的方法，其特征在于，所述培養基E由碳源、MSB5培養基、IAA、KT和Phytagel組成；培養基E中的IAA濃度0.001－0.01?mg/L，KT濃度0.001－0.01?mg/L，Phytagel濃度2.0－3.0g/L。

8.如權利要求1至7任一所述快速誘導及繁殖棉花胚性愈傷的方法，其特征在于，所用棉花選自普通陸地棉coker413、coker201或coker310。