[發明專利]一種大豆抗花葉病毒主效基因位點及應用

有效

• 申請號: 201310053813.2
• 申請日: 2013-02-20
• 公開（公告）號: CN103114145A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發明（設計）人: 陳海峰;沙愛華;單志慧;楊中路;張曉娟;張嬋娟;陳李淼;陳水蓮;邱德珍;周蓉;吳學軍;周新安
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院油料作物研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

1.鑒定或輔助鑒定大豆抗花葉病毒性狀的方法，包括如下步驟：分別以待鑒定大豆的基因組DNA為模板，用由SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2所示的兩條單鏈DNA組成的PCR引物對進行PCR擴增，通過聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測所得到的PCR產物，按照下述方法確定所述待鑒定大豆的抗花葉病毒性狀：

如果待鑒定大豆的PCR擴增產物在聚丙烯酰胺凝膠電泳中顯示為與中豆32的PCR擴增產物大小相同的條帶，所述待鑒定大豆為抗花葉病毒大豆或為候選抗花葉病毒大豆，如果所述PCR擴增產物在聚丙烯酰胺凝膠電泳中顯示為與中豆29的PCR擴增產物大小相同的條帶，所述待鑒定大豆為非抗花葉病毒大豆或為候選非抗花葉病毒大豆；

所述待鑒定大豆選自中豆29×中豆32的雜種后代中的F7及其以后世代的家系。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述聚丙烯酰胺凝膠電泳中，所述聚丙烯酰胺凝膠的濃度為60g/L，所述聚丙烯酰胺凝膠的交聯度為5%。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增中先進行10個第一個循環后再進行25個第二個循環，所述第一個循環的引物退火條件為60℃?30s，所述第二個循環的引物退火條件為55℃?30s。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：所述第一個循環的溫度程序是：先94℃?30s，然后60℃?30s，最后72℃?1min；所述第二個循環的溫度程序是：先94℃?30s，然后55℃?30s，最后72℃1min。

5.根據權利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述待鑒定大豆選自中豆29×中豆32的雜種后代中的F₇至F₁₁家系。

6.權利要求1-5中任一所述的方法的用途，所述用途為1）、2）或3）：

1）權利要求1-5中任一所述的方法在大豆育種中的應用；

2）權利要求1-5中任一所述的方法在大豆抗花葉病毒性狀的早期預測中的應用；

3）權利要求1-5中任一所述的方法在篩選抗花葉病毒大豆中的應用。

7.鑒定或輔助鑒定大豆抗花葉病毒性狀的引物對，名稱為GmSSR13-23，由SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2所示的兩條單鏈DNA組成。

8.含有權利要求7所述的引物對的鑒定或輔助鑒定大豆抗花葉病毒性狀的試劑或試劑盒。

9.權利要求7所述的引物對、權利要求8所述的試劑或試劑盒的用途，所述用途為a）、b）或c）：

a）權利要求7所述的引物對、權利要求8所述的試劑或試劑盒在大豆育種中的應用；

b）權利要求7所述的引物對、權利要求8所述的試劑或試劑盒在大豆抗花葉病毒性狀的早期預測中的應用；

c）權利要求7所述的引物對、權利要求8所述的試劑或試劑盒在篩選抗花葉病毒大豆中的應用。

10.一種大豆抗花葉病毒主效基因位點，其特征在于:所述主效基因位點為qRSC.13-1。