[發(fā)明專利]一種測定食品中山梨酸和苯甲酸的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310047161.1
• 申請日: 2013-02-01
• 公開（公告）號: CN103134870A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王麗麗;王曉青;孫楊;黃翌磊;潘再法
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

（一）技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種測定食品中山梨酸和苯甲酸的方法，通過將中空纖維液相微萃取技術(shù)結(jié)合氣相色譜在線衍生化法快速測定飲料及調(diào)料中添加的山梨酸、苯甲酸的含量。

（二）背景技術(shù)

防腐劑主要作用是抑制微生物的生長和繁殖，以延長食品的保存時(shí)間，抑制物質(zhì)腐敗。山梨酸和苯甲酸及其鈉鹽和鉀鹽是目前應(yīng)用最為廣泛的防腐劑之一，對霉菌、酵母及細(xì)菌有一定的抑菌能力，常用于果汁、醋、醬油、蔬菜、飲料等食品中。使用過量會(huì)對人體有害，我國食品安全標(biāo)準(zhǔn)對食品中的防腐劑的使用量進(jìn)行了限定，如碳酸飲料中含量不能超過0.2g/kg，醬油中含量不能超過1.0g/kg，沙拉中含量不能超過1.0g/g。

苯甲酸和山梨酸在實(shí)際樣品中添加量較少。若采用常規(guī)的氣相色譜法分析，往往需要采用復(fù)雜的前處理過程對樣品中其進(jìn)行富集。另外，苯甲酸和山梨酸具有一定的極性，采用氣相色譜分析時(shí)，相應(yīng)的色譜峰會(huì)出現(xiàn)拖尾并且響應(yīng)低，不利于準(zhǔn)確的定量。本發(fā)明將有機(jī)堿作為中空纖維液相微萃取中的受體相，在完成對酸性物質(zhì)如苯甲酸和山梨酸的萃取同時(shí)，還能在氣相色譜進(jìn)樣口將它們衍生化成相應(yīng)的甲酯，進(jìn)一步提高了檢測的靈敏度。而中空纖維液相微萃取（HF-LPME）的方法，具有裝置簡單、成本低廉、有機(jī)溶劑消耗少、避免交叉污染等優(yōu)點(diǎn)。因此應(yīng)用液-液-液三相微萃取-在線衍生化氣相色譜法可以很好的分析山梨酸和苯甲酸。

（三）發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一種利用液-液-液三相微萃取與在線衍生化氣相色譜法同時(shí)檢測山梨酸和苯甲酸的方法，將有機(jī)堿作為萃取的接受相，在對樣品中山梨酸和苯甲酸萃取的同時(shí)來完成對其衍生化過程，并對多種食品中的苯甲酸和山梨酸進(jìn)行同時(shí)、快速有效的定性定量分析。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

本發(fā)明提供一種測定食品中山梨酸和苯甲酸的方法，特別是測定液體待測樣品中山梨酸和苯甲酸的方法，所述方法為：以中空纖維為載體，以有機(jī)堿為受體相，以有機(jī)溶劑為有機(jī)相制成中空纖維液相微萃取裝置，然后采用中空纖維液相微萃取裝置對待測樣品進(jìn)行萃取，取萃取后的受體相進(jìn)行氣相色譜檢測，獲得待測樣品的氣相色譜譜圖，再分別對山梨酸標(biāo)準(zhǔn)品和苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行氣相色譜分析，以各自峰面積為縱坐標(biāo)，以各自標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)分別制作山梨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線和苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的氣相色譜譜圖及山梨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線和/或苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測樣品中山梨酸和/或苯甲酸含量。

進(jìn)一步，所述有機(jī)堿以0.1~0.5g/ml有機(jī)堿水溶液或以0.1~0.5g/ml有機(jī)堿甲醇溶液的形式加入。

進(jìn)一步，所述有機(jī)堿為四甲基醋酸銨（TMAAc）、四甲基氫氧化銨（TMAH）或三甲基氫氧化硫（TMSH）。

進(jìn)一步，所述有機(jī)溶劑為正辛醇、甲苯、正己烷、環(huán)己烷或乙酸乙酯。

進(jìn)一步，所述中空纖維為聚丙烯中空纖維，內(nèi)徑為600μm，壁厚200μm，孔徑為0.2μm，最優(yōu)選AccureL?Q3/2聚丙烯中空纖維（膜內(nèi)徑600μm，膜壁厚200μm，膜孔徑0.2μm）。

本發(fā)明所述采用中空纖維液相微萃取裝置對待測樣品進(jìn)行萃取前先將待測樣品與硫酸和無水硫酸鈉混合制成樣品混合液，然后采用中空纖維液相微萃取裝置對樣品混合液進(jìn)行萃取；所述樣品混合液中硫酸與待測樣品體積比為2~3:100（優(yōu)選2.75:100），所述硫酸為質(zhì)量濃度98%濃硫酸，無水硫酸鈉的質(zhì)量用量以待測樣品體積計(jì)為0.05~0.25g/mL，優(yōu)選0.05~0.20g/mL。

進(jìn)一步，所述對樣品混合液的萃取按如下步驟進(jìn)行：將待測樣品與硫酸和無水硫酸鈉混合制成樣品混合液，再將中空纖維于無水乙醇中超聲清洗，自然晾干，然后將中空纖維一端封口（將棒狀接口接于纖維一端，使微量進(jìn)樣器可插入纖維腔底部以注入或移除受體溶液，即將另一端套于微量進(jìn)樣針的針頭上），制成預(yù)處理后的中空纖維；然后將預(yù)處理后的中空纖維在有機(jī)相中充分浸泡后用去離子水清洗，獲得含有機(jī)相的中空纖維，再將受體相注入含有機(jī)相的中空纖維腔中制成中空纖維液相萃取裝置；將中空纖維液相萃取裝置置于樣品混合液中，在攪拌子的作用下進(jìn)行萃取，在100~1200r/min的攪拌速度下萃取20~120min；所述受體相為有機(jī)堿或無水甲醇，所述有機(jī)堿為四甲基醋酸銨、四甲基氫氧化銨或三甲基氫氧化硫，所述有機(jī)相為正辛醇；所述樣品混合液中樣品混合液中硫酸與待測樣品體積比為2.75:100，所述硫酸為質(zhì)量濃度98%濃硫酸，無水硫酸鈉的質(zhì)量用量以待測樣品體積計(jì)為0.2g/mL；所述中空纖維為聚丙烯中空纖維，內(nèi)徑為600μm，壁厚200μm，孔徑為0.2μm，所述中空纖維長度為2cm。