[發(fā)明專利]一種煙草中麥草畏殘留量的測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310046867.6
• 申請日: 2013-02-06
• 公開（公告）號: CN103149313A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 熊巍;陶曉秋;韶濟民;楊雪;龐夙;張海燕;黃玫
• 申請（專利權(quán)）人: 中國煙草總公司四川省公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 成都信博專利代理有限責(zé)任公司 51200
• 代理人: 舒啟龍;卓仲陽

1.一種測定煙草中麥草畏含量的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

1）提取煙草中的目標物

稱取烘干磨好的煙葉樣品，加入純水浸潤，依次加入氘代內(nèi)標，乙腈和甲酸，渦漩混合振蕩；放入冰箱冷凍后取出，依次加入無水硫酸鎂，氯化鈉，檸檬酸鈉和檸檬酸二氫鈉，渦旋振蕩后離心；

2）N-丙基乙二胺純化

移取上清液于新的離心管中，加入無水硫酸鎂及PSA吸附劑，于漩渦振蕩混合，然后高速離心；吸取上清液經(jīng)有機相濾膜過濾，移取濾液，并用乙腈和超純水稀釋后待測；

3）標準儲備液和標準工作液的配制

用乙腈配置麥草畏標準儲備液，儲存于棕色玻璃瓶中，-20℃保存；取一定量的儲備液進行混合，用乙腈稀釋定容，制得混合標準儲備液；

用乙腈準確配置麥草畏-d₃氘帶內(nèi)標標準儲備液，儲存于棕色玻璃瓶中，-20℃保存；取一定量的內(nèi)標儲備液進行混合，用乙腈稀釋定容，制得混合內(nèi)標標準儲備液；所有的儲備液于冰箱-20℃，使用前將其恢復(fù)到室溫；

用國際煙草科學(xué)研究合作中心空白煙葉的萃取基質(zhì)配制不同濃度的麥草畏標準工作溶液；

4）液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）測定：吸取空白煙葉溶液和配制好的不同濃度的麥草畏標準工作溶液，注入LC-MS/MS系統(tǒng)，按內(nèi)標法以峰面積計算出樣品待測液中麥草畏含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定煙草中麥草畏含量的方法，其特征在于，所述煙葉的重量為2g。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的測定煙草中麥草畏含量的方法，其特征在于，步驟1）中所述冷凍時間為10min，冷凍溫度為-18至-15℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的測定煙草中麥草畏含量的方法，其特征在于，步驟1）中提取過程依次加入的超純水，氘代內(nèi)標，乙腈和甲酸的體積分別為10mL，20L，10mL和200L；渦旋振蕩1min；離心管在-10℃條件下保持10min；依次加入的無水硫酸鎂，氯化鈉，檸檬酸鈉和檸檬酸二氫鈉的質(zhì)量分別為4g，1g，1g和0.5g；然后漩渦混合振蕩的速率為2000rpm，振蕩時間為2min，離心時間為10min。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的測定煙草中麥草畏含量的方法，其特征在于，步驟2）中，加入無水硫酸鎂及PSA吸附劑的質(zhì)量為150mg和25mg。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定煙草中麥草畏含量的方法，其特征在于，步驟2）中移取濾液體積為200L，加入乙腈和超純水的體積為100L和700L。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的測定煙草中麥草畏含量的方法，其特征在于，步驟4）中選取70%甲酸水和30%乙腈初始流動相體系，分析時間為4min，進樣量為10μL。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的測定煙草中麥草畏含量的方法，其特征在于，步驟4）中梯度洗脫條件為梯度洗脫條件：0~2min，70%A~10%A；2~3.5min，10%A~10%A；3.5~3.51min，10%A~70%A；3.51~4.00min，70%A~70%A；流動相流速為0.7mL/min。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的測定煙草中麥草畏含量的方法，其特征在于，步驟4）串聯(lián)質(zhì)譜檢測器的條件：ESI-，噴霧電壓：2.6kV，霧化氣流量：800L/Hr；錐孔氣(cone)流量50L/Hr，離子化溫度350℃；碰撞氣流量為0.15ml/min；碰撞氣為氬氣，其余氣體為氮氣；駐留時間為30msec，負離子MRM模式采集。