[發明專利]蝗蟲取食偏好性檢測的方法及檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201310044274.6
• 申請日: 2013-02-04
• 公開（公告）號: CN103114143A
• 公開（公告）日: 2013-05-22
• 發明（設計）人: 吳惠惠;曹廣春;張澤華
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京法思騰知識產權代理有限公司 11318
• 代理人: 高宇

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體地涉及蝗蟲取食偏好性檢測的方法及檢測試劑盒。

背景技術

植物為昆蟲提供食物與棲境，植食性昆蟲對寄主植物有明顯的選擇性。蝗蟲是生態系統中重要的成員，在生物鏈中發揮重要的作用。同時也是消費者之一，為害農業生產，與牲畜爭食飼用植物。定性定量檢測蝗蟲的食性食量可以生物防治、生態治理、多樣性調控提供技術指導。

蝗蟲食性研究方法有罩籠內蝗蟲取食特性研究、蝗蟲口器結構適應性測試、蝗蟲糞便形態特征分析、蝗蟲消化道形態學研究、直翅目昆蟲嗦囊內含物(食糜)顯微分析技術等；最常見的蝗蟲食量測定方法包括：葉面積消耗測定食量法、對比稱重測定食量法、糞便量推測食量法罩等。這些方法在同時分析不同種類蝗蟲、取食多種植物時存在一定局限，定量誤差較大。高等植物中的ITS序列是18SrDNA-5.8SrDNA-26SrDNA間隔區序列，所受的選擇壓力小，進化速率較快，在物種間表現出較高的差異。因此，ITS序列可以作為植物種類定性遺傳標記，應用定量PCR技術，可以精準而快速的定性定量檢測蝗蟲取食特性。

發明內容

本發明的目的是提供一種蝗蟲取食偏好性檢測的方法。

本發明的再一目的是提供蝗蟲取食偏好性檢測的試劑盒。

根據本發明的方法，首先克隆得到：

1、克氏針茅ITS區基因序列（5’-3’）SEQ?ID?No.1:

TACGACAACAGACCGCGCACGCGTCACCCATCCCGCCGGCGGTGGCACTGCCCGCCGTCCGGCCAAGTCCCCGACCACCTCCCCTCCCCGGAGGGGGGGCCGGGGCGACAGAACCCACGGCGCCGAAGGCGTCAAGGAACACTATGCCTAACTCGGGGGCGCGGCTGGCCTGCCGGCCGCCCCCTGCGTTGCGATGCTATCTAATCCACACGACTCTCGGCAACGGATATCTCGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGTAGCGAAATGCGATACCTGGTGTGAATTGCAGAATCCCGCGAACCATCGAGTCTTTGAACGCAAGTTGCGCCCGAGGCCACCCGGCCGAGGGCACGCCTGCCTGGGCGTCACGCCAAAACACGCTCCCACCCCCCTCACCGGGGAGCGGGACGCGGCGTCTGGCCCCCCGTGCCGCGAGGCGCGGTGGGCCGAAGATCGGGCTGCCGGCGTACCGTGCCGGGCACAGCGCGTGGTGGATCTCTACTCGGCGCAGTGCACCCGGCGCGTAGCCAGCGCAGTGGCCCCCTAAGGACCCAACGAACGGAGCGCGAGCCGCTCCGACCGCGACCCCAGGTCAGGCGGGACTACCCGCTGAGTTTAAGCATATCAATAAA

2、羊草ITS區基因序列（5’-3’）SEQ?ID?No.2:

GACGACAAACAGACCGCGCACGCGTCATCCAATCCGCCGGTGGCGGCACCGTCCGTCGCTCGGCCAAGTCCTCGACCGCCTCCCCTCCTCGGAGTGGGGGCTCGGGGTAAAAGAACCCACGGCGCCGAAGGCGTCAAGGAACACTGTGCCTAACCCGGGGGCATGGCTAGCTTGCTAGTCGTCCCCCGTGTTGCAAAGCTATTTAATCCACACGACTCTCGGCAACGGATATCTCGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGTAGCGAAATGCGATACCTGGTGTGAATTGCAGAATCCCGCGAACCATCGAGTCTTTGAACGCAAGTTGCGCCCAAGGCCACTCGGCCGAGGGCACGCCTGCCTGGGCGTCACGCCAAAACACGCTCCCAACCCCCCTCATCGGGAATAGGGATGCGGCATATGGTCCCTCGTCTCGCAAGGGGCGGTGGGCCGAAGATCGGGCTGCCGGCGGACCGCGCCGGACACAGCGCATGGTGGGCGTCCTCGCTTTATCAACGCAGTGCATCCGACGCGTAGCCGGCGTGATGGCCTCAAAAGGACCCAGCAAACGAAGCGCACGTCGCTTCGACCGCGACCCCAGGTCAGGCGGGACTACCCGCTGAGTTTAAGCATATCAATAAA