[發明專利]一種測定飼料中維生素C含量的方法

有效

• 申請號: 201310041371.X
• 申請日: 2013-02-01
• 公開（公告）號: CN103163203A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發明（設計）人: 劉慶生;任澤林;范志影;曾虹;張萍;馬書宇;趙維香;田園;李慧;黃吉波
• 申請（專利權）人: 北京英惠爾生物技術有限公司;中國農業科學院飼料研究所
• 主分類號: G01N27/48
• 分類號: G01N27/48
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種測定飼料中維生素C含量的測定方法。

背景技術

維生素C是水產養殖中必需添加的維生素添加劑之一。維生素C含量的檢測方法大多采用氧化還原滴定法(碘量法和靛酚藍法)，這一類方法的特點是所用設備成本低廉，操作簡便，只適合檢測單一的維生素C制品和簡單基質樣品中維生素C含量的測定，多用于醫藥和食品行業。目前飼料行業多用碘量測定法維生素C原料制品，以此來判定其質量。對于維生素預混合飼料和配合飼料中維生素C的檢測尚未頒布方法標準，雖有人發表過“配合飼料中維生素C測定的分光光度法”、也有人試圖用高效液相色譜技術解決這一難題，但由于維生素C極易被氧化的特點和飼料基質的復雜，加之檢測過程繁瑣和設備昂貴，因此無法實現飼料中這一關鍵成分檢測。分光光度法針對不同配合飼料樣品方法無可重復性，液相色譜法最好也只能得到70％的添加同收率。

發明內容

本發明的目的是提供一種測定飼料中維生素C的方法。

本發明所提供的測定飼料中維生素C的方法，是采用伏安極譜法(即應用伏安極譜儀進行檢測)，包括下述步驟：

1)將待測樣品即含維生素C的飼料用pH值3-5的乙酸緩沖溶液配制成溶液，然后進行超聲提取，得到待測樣品溶液；

2)分為下述a)或b)：

a)采用標準加入法，取數份等體積的所述待測樣品溶液，并向其中加入不同量的維生素C標準溶液，其中一份樣品溶液中不加標準溶液，然后用pH值3-5的乙酸緩沖溶液定容至相同體積，對所得的溶液均以-0.2V為起始電位、0.3為終止電位進行電位掃描，繪制各溶液的極譜圖(即I-U曲線)并記錄極譜波峰電流值；

b)采用標準加入法，先取所述樣品溶液用pH值3-5的乙酸緩沖溶液稀釋后，以-0.2V為起始電位、0.3V為終止電位進行電位掃描，繪制極譜圖(即I-U曲線)并記錄極譜波峰電流值；然后依次向所述稀釋后的溶液中加入維生素C標準溶液，每次加入標準溶液混合均勻后，均以-0.2V為起始電位、0.3V為終止電位進行電位掃描，繪制極譜圖(即I-U曲線)并記錄極譜波峰電流值；

3)以加入的維生素C的濃度為橫坐標，對應的極譜波峰電流值為縱坐標，繪制工作曲線，用外推法(延長工作曲線和橫坐標相交的數的絕對值)，即可得到待測樣品中的維生素C濃度。

其中，所述飼料中的維生素C既可以是維生素C原粉，也可以是包膜維生素C(如市售的包膜維生素C：惠爾C)。因包膜維生素C的緩釋效應可以有效提高其利用率，因而在目前的飼料中被廣泛添加使用。

所述飼料具體可為添加維生素C的水產飼料，如魚飼料等。

步驟1)中所述乙酸緩沖溶液優選pH值為4.6的乙酸緩沖溶液。配制方法如下：取1L去離子水溶液，添加0.1mol的乙酸和0.1mol的乙酸鈉，混勻即得。

步驟1)中所述超聲提取的功率為60-80W，提取時間為3-10min。

步驟1)中所述待測樣品溶液中的維生素C濃度應不小于0.5mg/L，才能保證準確測定。

步驟2)中所述電位掃描的掃描速率為0.0050～0.01V/s，具體可選擇0.0062V/s。

步驟2)中通常取三份等體積的待測樣品溶液，一份0標準添加，另兩份加入不同量的維生素C標準液。

由于飼料中的成分比較復雜且待測維生素C的含量低，而標準加入法恰恰適用于樣品組分復雜的情況。采用該方法能消除基體效應帶來的影響，有利于提高測定的準確度。

為了得到較為精確的外推結果，多采用三個點(包括待測樣溶液本身)來作外推曲線，并且第一份加入的標準溶液與待測溶液的濃度之比應適當。增量值的大小可這樣選擇，使第一個加入量產生的波峰電流值約為試樣原波峰電流值的一半。

本發明采用伏安極譜法測定飼料(包括添加包膜維生素C)中的維生素C含量，樣品處理簡單，操作過程省時，避免了繁瑣的操作過程造成的維生素C氧化；應用標準添加法工作曲線排除了樣品的基質干擾；采用靈敏度高的電化學檢測器加之檢測是在屏蔽氧氣的條件下完成，方法回收率高，檢測結果準確。對該方法的精密度和準確度進行分析，結果證明利用本發明方法測定飼料中的維生素C含量，重現性好，靈敏度高，準確性好，檢測限低，為準確測定飼料中的維生素C提供了一種全新的方法。

附圖說明

圖1為待測樣品及標準外加樣品的極譜圖。

圖2為待測樣品及標準外加樣品的極譜波峰電流值-濃度工作曲線圖。

具體實施方式