[發明專利]植物質膜蛋白再溶解的方法及其在雙向熒光差異凝膠電泳中的應用

無效

• 申請號: 201310041325.X
• 申請日: 2013-02-01
• 公開（公告）號: CN103130866A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發明（設計）人: 李銀心;聶玲玲;陳顯揚;郭杰;范鵬祥
• 申請（專利權）人: 中國科學院植物研究所
• 主分類號: C07K1/02
• 分類號: C07K1/02;C07K1/30;G01N27/447
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種植物質膜蛋白再溶解的方法，包括如下步驟：將植物質膜蛋白加入裂解液中，在冰浴中超聲處理，然后渦混使所述植物質膜蛋白溶解，最后離心收集上清液，即為植物質膜蛋白溶液；所述裂解液是在DIGE裂解緩沖液中加入N-十二烷基-β-D-麥芽糖苷得到的，所述N-十二烷基-β-D-麥芽糖苷在所述裂解液中的濃度為0.5-2g/100mL。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述N-十二烷基-β-D-麥芽糖苷在所述裂解液中的濃度為1g/100mL。

3.一種制備用于進行2-D?DIGE的植物質膜蛋白溶液的方法，是將植物質膜蛋白用權利要求1或2所述的方法進行再溶解，得到植物質膜蛋白溶液。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于：所述植物質膜蛋白的制備方法依次包括如下步驟：

（1）在植物質膜懸浮液中加入冰甲醇，渦混4-10min后離心；

（2）加入氯仿，渦混4-10min后離心；

（3）加入ddH₂O，渦混4-10min后離心，棄除最上面的一層；

（4）加入冰甲醇，渦混4-10min后離心，收集沉淀；

（5）用冰甲醇洗滌沉淀，得到植物質膜蛋白。

5.如權利要求1至4中任一所述的方法，其特征在于：所述植物為單子葉植物或雙子葉植物。

6.如權利要求1至4中任一所述的方法，其特征在于：所述植物為甜土植物或鹽生植物。

7.如權利要求1至4中任一所述的方法，其特征在于：所述植物為鹽角草或擬南芥。

8.權利要求1至7中任一所述的方法在2-D?DIGE中的應用。