[發明專利]一種大黃藥材的指紋圖譜的鑒別方法

有效

• 申請號: 201310040432.0
• 申請日: 2013-02-02
• 公開（公告）號: CN103969352A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發明（設計）人: 果德安;吳婉瑩;趙丙賢;呂延英;劉蓉霞;姚帥;王俊平;趙興;蔡錄影;王丹丹;侯晉軍;笪娟
• 申請（專利權）人: 西安世紀盛康藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種大黃藥材指紋圖譜的鑒別方法，具體地說是用高效液相色譜指紋圖譜法來對大黃藥材的有效成分進行質量控制的一種鑒別方法。

背景技術

大黃具有攻積滯、清濕熱、瀉火、涼血、祛瘀、解毒等功效，為《中華人民共和國藥典2010版》一部收載品種。大黃為蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum, L．、唐古特大黃Rheum tanguticum／ Maxim. ex Balf.或藥用大黃RheumojflcinaleBaill.的干燥根和根莖。大黃藥材中的主要成分是蒽醌苷及雙蒽酮苷，其醌苷有： 大黃酚-1-葡萄糖苷或大黃酚苷、大黃素-6-葡萄糖苷、蘆薈大黃素-8-葡萄糖苷、大黃素甲醚葡萄糖苷、大黃酸-8-葡萄糖苷；掌葉大黃中還含有大黃素雙葡萄糖苷、蘆薈大黃素雙葡萄糖苷、大黃酚雙葡萄糖苷。雙蒽酮苷有番瀉苷A、B、C、D、E、F。游離型蒽醌類主要有：大黃酚、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酸。大黃又含有大黃鞣酸及其相關物質, 如沒食子酸、兒茶素、大黃四聚素。此外，大黃尚含有脂肪酸、草酸鈣、葡萄糖、果糖和淀粉。目前大黃藥材的質量控制方法主要有：以蘆薈大黃素(C₁₅H₁₀O₅)、大黃酸(C₁₅H₈0₆)、大黃素(C₁₅H₁₀0₅)、大黃酚(C₁₀H₁₀0₄)和大黃素甲醚(C16H1205)的總量測定作為含量測定方法《中華人民共和國藥典2010版一部》；中藥指紋圖譜是指某些中藥材或中藥制劑經適當處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標示其化學特征的色譜圖或光譜圖。中藥指紋圖譜是一種綜合的，可量化的鑒定手段，它是建立在中藥化學成分系統研究的基礎上，主要用于評價中藥材以及中藥制劑半成品質量的真實性、優良性和穩定性。“整體性”和“模糊性”為其顯著特點。中國食品藥品監督管理局于2000年頒布了《中藥注射劑指紋圖譜研究的技術要求（暫行）》，要求中藥注射劑必須進行指紋圖譜的研究，并建立其相關的標準。規范了中藥指紋圖譜的研究，從而掀起了國內近幾年來對指紋圖譜的研究熱潮。目前，對中藥材質量控制較成熟的方法有單個成分含量測定或一類成分如總皂苷、總黃酮等的紫外分光光度測定法，不能對制劑進行全面直觀的質量控制。采用指紋圖譜技術除了能反映幾乎全部成分的含量、種類外，尚能反映成分的比例、未知成分（含量測定方法中可能已被作為無效或干擾成分扣除）的產生，更多的是從藥物穩定性、安全性上進行監測。

《中國藥典》2010年版，采用薄層色譜法對大黃藥材進行鑒別，由于薄層色譜法鑒別法本身受溫度、濕度、薄層板厚度以及載樣量等諸多因素影響，存在樣品的化學成分體現不完全，可鑒別的成分數量較少，同一樣品的重現性不佳的缺點，而已有文獻報道的大黃指紋圖譜技術，圖譜中體現的化學成分較少，提供的信息量小，不能很好地代表大黃藥材的整體質量，不能對大黃藥材的質量進行有效的鑒別。而采用本發明方法則可充分展示大黃化學成分的指紋圖譜，信息量豐富，方法重現性良好，可有效鑒別大黃藥材的質量。

發明內容

本發明的目的是提供一種大黃藥材的指紋圖譜鑒別方法，通過指紋圖譜測定對大黃藥材進行全面而有效的鑒別。

本發明的目的是通過如下技術方案實現的。

本發明大黃藥材的指紋圖譜鑒別方法，該方法包括如下步驟：

(a)色譜條件與系統適應性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈或甲醇、乙腈甲醇混合溶劑為流動相A，以甲酸水溶液或冰醋酸水溶液、磷酸水溶液、三氟乙酸水溶液為流動相B。檢測器為紫外檢測器、示差檢測器或蒸發光檢測器；

(b)供試品溶液的制備取大黃藥材粉末（過篩），精密稱定，加水浸泡，加熱回流，提取液離心，濾過，取濾液，加入乙醇，靜置一夜。吸取上清液，熱空氣吹干，加水溶解，用微孔濾膜濾過，取續濾液，備用。

(c)測定法 吸取供試品溶液適量，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，即得。

進一步優選的測定條件為：

(a)色譜條件與系統適應性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(柱長10～25cm，內徑3～5cm，粒徑為1～10μm)；以乙腈為流動相A，以0.01～2%冰醋酸水溶液為流動相B；紫外檢測器，檢測波長200～400nm；柱溫20～50℃，流速為每分鐘0.2～2ml。