[發(fā)明專利]一種分枝蟲草菌株及其子實體和人工栽培方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310037585.X | 申請日： | 2013-01-30 |
| 公開（公告）號： | CN103098648A | 公開（公告）日： | 2013-05-15 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 宋斌;林群英;李泰輝;林敏;李挺;鄧旺秋;沈亞恒 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣東省微生物研究所 |
| 主分類號： | A01G1/04 | 分類號： | A01G1/04 |
| 代理公司： | 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001 | 代理人： | 潘偉健 |
| 地址： | 510070 *** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 分枝 蟲草 菌株 及其 實體 人工 栽培 方法 | ||
1.分枝蟲草菌GDIM_CR20110521Cordyceps?ramosa?GDIM_CR20110521CCTCC?NO：M2013015。
2.一種分枝蟲草子實體，其特征是由權(quán)利要求1所述的分枝蟲草菌或其新鮮子實體進(jìn)行組織分離后人工栽培獲得的，該子實體稍扁狀，頂部常見尖狀或圖純，不分枝或頂部有短分枝，淺暗黃褐色。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的分枝蟲草子實體，其特征是所述的新鮮子實體是野生或栽培成功后獲得的子實體。
4.權(quán)利要求2或3所述的分枝蟲草子實體的人工栽培方法，其特征包括以下的步驟：
（1）將權(quán)利要求1所述的分枝蟲草菌或其野生或栽培成功后獲得的子實體進(jìn)行組織分離，取子座按黃豆大小的接種量接入綜合PDA斜面培養(yǎng)基，25～28℃，空氣相對濕度60%～80%時，先暗培養(yǎng)7～10天后，光照3～4天，再暗培養(yǎng)15～30天，至菌絲長滿斜面，挑取基生菌絲發(fā)達(dá)且轉(zhuǎn)成黃色的斜面作為母種，所述的綜合PDA斜面培養(yǎng)基pH6.0～6.5，其原料組成為每1000mL水中加入馬鈴薯200g，葡萄糖20g，KH2PO43g，MgSO4·7H2O1.5g，維生素B10.02～0.05g，瓊脂15～20g；
（2）將步驟（1）得到的母種按黃豆大小的菌塊接入黃豆芽汁馬鈴薯斜面培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)或復(fù)壯，于25～28℃，空氣相對濕度60%～80%時，先暗培養(yǎng)7～10天后，光照3～4天，再暗培養(yǎng)15～30天，至菌絲長滿斜面，挑取基生菌絲發(fā)達(dá)且轉(zhuǎn)成黃色的斜面作為二級母種，所述的黃豆芽汁馬鈴薯斜面培養(yǎng)基pH6.0～6.5，其原料組成為每1000mL水中加入黃豆芽汁100g，馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂15～20g，其制備方法是按原料組成分別稱量各組分后，把馬鈴薯去皮切小長條，再放入黃豆芽汁，加水煮沸20～30分鐘左右至馬鈴薯軟而不爛時，用6～8層紗布過濾，余下的濾汁在加熱狀態(tài)下與其余組分混合攪拌均勻，趁熱裝于試管滅菌后，待冷卻至70～80℃，制成斜面；
(3)將步驟(2)得到的二級母種按每100mL培養(yǎng)基接入10-15塊黃豆大小的菌塊的接種量接種至液體培養(yǎng)基中，于20～25℃，以120～150r/min的轉(zhuǎn)速震蕩培養(yǎng)6～10天，挑取菌絲球大小均勻一致、直徑為2～3mm的菌種作為一級菌種，所述的液體培養(yǎng)基pH6.0～6.5，其組成是每1000mL培養(yǎng)基中含葡萄糖10g，酵母浸膏3g，麥芽浸出粉3g，蛋白胨5g和余量的水；
(4)將步驟(3)得到的一級菌種按液體培養(yǎng)基體積5%～10%的接種量接入液體培養(yǎng)基中，于20～25℃，以140～150r/min的轉(zhuǎn)速震蕩培養(yǎng)7～10天，挑取菌絲球大小均勻一致、直徑為2～3mm的菌種作為生產(chǎn)種，所述的液體培養(yǎng)基與步驟(3)的培養(yǎng)基相同；
（5）在無菌的環(huán)境條件下，將步驟(4)得到的生產(chǎn)種用水稀釋，再按每1000mL生產(chǎn)種接種到0.5～0.8kg生產(chǎn)用培養(yǎng)基的比例進(jìn)行接種，在20～25℃，空氣相對濕度50%～75%下，先暗培養(yǎng)7～12天，至菌絲基本長滿培養(yǎng)基后，進(jìn)行光照培養(yǎng)，光強(qiáng)400～700lx，8～10h/d，空氣相對濕度80%～90%，25～28℃，經(jīng)7～10天長出子實體原基，再培養(yǎng)50～60天，至部分子實體頂部出現(xiàn)白點，或出現(xiàn)孢子時，即可采收，得到分枝蟲草子實體，所述的生產(chǎn)用培養(yǎng)基是按1kg大米和1～2L營養(yǎng)液的比例組成，其中每升營養(yǎng)液由葡萄糖10g，蛋白胨5g，麥芽浸出粉3g，酵母浸膏3g，以及余量的水組成，pH6.0～6.5。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的分枝蟲草子實體的人工栽培方法，其特征是步驟(1)所述的綜合PDA斜面培養(yǎng)基的制備方法是按原料組成分別確定各組分的重量后，把馬鈴薯去皮切小長條，煮沸20～30分鐘至馬鈴薯軟而不爛時，用6～8層紗布過濾，余下的濾汁在加熱狀態(tài)下與其余組分混合攪拌均勻，趁熱裝于試管滅菌后，待冷卻至70～80℃，制成斜面；步驟(3)所述的一級菌種用同樣的方法按液體培養(yǎng)基體積5%～10%的接種量接入液體培養(yǎng)基進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng)為二級菌種；步驟(5)所述的分枝蟲草子實體還在60℃下烘4～5小時得到干品。
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