[發明專利]蘄山藥試管零余子快速繁殖方法

無效

• 申請號: 201310031033.8
• 申請日: 2013-01-28
• 公開（公告）號: CN103190342A
• 公開（公告）日: 2013-07-10
• 發明（設計）人: 康薇;鄭進
• 申請（專利權）人: 湖北理工學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 張安國;伍見

技術領域

本發明涉及一種蘄山藥試管零余子的快速繁殖方法，旨在通過植物組織培養技術實現蘄山藥零余子的規模化生產。屬于生物工程和農業生物技術領域。?

技術背景

醫圣李時珍故里湖北省蘄春縣山藥種植歷史悠久，蘄山藥（Dioscoreae?Oppositae“Qi”）是以蘄春縣為原產地的鄂東地區大面積種植的山藥優良地方種，為《本草綱目》所推崇。僅在蘄春縣蘄山藥的常年種植面積就超過2000hm²，年產山藥逾7×10⁴t，已經成為當地政府重點扶持的農業特色支柱產業，2012年申報了中國地理標志產品保護。?

目前，蘄山藥主要采用無性繁殖方式進行繁育，所用的營養器官有栽子、塊莖和零余子。各種營養器官繁育蘄山藥的優勢和缺點都十分明顯，例如，用栽子繁育可以直接栽種，出苗整齊，長勢旺，山藥產量高、賣相好，但工作量大、成本高，不適合大面積生產，且連續栽種3～4年后，頂芽退化嚴重，產量大幅下降；用塊莖切段繁育連續栽種不易退化，有利于種性的保持，但用種量大，塊莖分割費工費時，成本高，且出芽時間長，早春遇上陰雨天然氣，爛種、死苗時有發生，影響產量和品質；用零余子繁育能夠大量節省種薯，省時省工，但生產周期較長，且連續多年播種零余子后種質出現嚴重退化。因此，尋找一種合理的繁育方式一直是蘄山藥生產上的一道難題。2010年以來，申請人采用組織培養技術繁育蘄山藥，在較短時間內獲得了大量的蘄山藥種苗，并申請了國家發明專利“蘄山藥組培育苗方法”（專利申請號:201110451511.1）。雖然采用組織培養技術繁育蘄山藥種苗，不僅可以獲得優良性狀的單株，而且可以改善品質，保持蘄山藥種的純度，但由于受技術條件的限制和傳統用種習慣的影響，目前無法在農戶中大面積推廣。?

生產實踐中，農戶通常采用塊莖和零余子交替繁育，以維持蘄山藥的種性不被退化。零余子是山藥的葉腋處長出的珠芽（俗稱為氣生塊莖），大田條件下一般在山藥收獲期采摘零余子。由于零余子的形成影響地下塊莖的產量，為了提高產量和保證山藥的品質，農戶習慣于用“疏芽”的方式去掉零余子，使得零余子的數量和品質都不能滿足生產上的需要，以致影響塊莖與零余子交替繁育的保種效果。由于在現有技術中還沒有解決蘄山藥零余子的人工誘導條件和試管零余子的生產等問題，因此，借助植物組織培養技術規模化生產蘄山藥零余子，對于解決蘄山藥生產上零余子的實際需求具有重要的現實意義。?

發明內容

本發明的目的是建立一種蘄山藥試管零余子的快速繁殖方法，實現人工規模化生產蘄山藥零余子，縮短生產周期，降低生產成本，提高生產效率。?

實現本發明的技術方案為：?

一種蘄山藥試管零余子的繁殖方法，以通過莖尖組織培養獲得的蘄山藥脫毒試管苗為外植體，以改良的MS培養基為培養基，該培養基中NH₄NO₃含量為MS培養基的1/4～3/4，同時添加BA（細胞分裂素）1.0mg/L、NAA(是萘乙酸，為生長素的一種)0.5mg/L、蔗糖80.0g/L、瓊脂4.5g/L、活性炭0.5g/L，調節pH為5.8～6.0，置于半固體培養基上培養；在光照時數12h/d、光照強度2500lux、培養溫度25±2℃，培養蘄山藥試管零余子?

按照所述的蘄山藥試管零余子的繁殖方法，用帶3～4片葉且去掉頂芽的蘄山藥無根脫毒試管苗為外植體，直接接種于試管零余子誘導培養基上，培養周期為10w，試管零余子誘導率達93%以上，零余子發生個數達3.69個/株，每年生產4～5次。?

從上述操作步驟可以看出，與傳統的大田生產零余子方法相比，本發明蘄山藥試管零余子繁殖方法的優勢主要表現在：?

由于采用蘄山藥脫毒試管苗繁殖零余子，不僅可以選擇優良性狀的單株，而且可以改善品質，保持種的純度，因此，可以克服大田生產零余子存在的不足；同時，本發明將生產周期從大田生產的1年，縮短為10w，每年可生產4～5次。采用本發明的方法可進行蘄山藥試管零余子工廠化生產，單位面積培養室可年產零余子11～15萬個（見表1），可節省大量人工和土地，成本較低，生產效率較高。?

表1??2012年蘄山藥試管零余子生產效率統計?

具體實施方式

外植體蘄山藥脫毒試管苗的培育：?