[發明專利]一種用RNA病毒轉化植物原生質體的方法有效
| 申請號: | 201310029545.0 | 申請日: | 2013-01-25 |
| 公開(公告)號: | CN103060380A | 公開(公告)日: | 2013-04-24 |
| 發明(設計)人: | 韓成貴;范慧艷;李大偉;于嘉林;王穎;張永亮;武文琦;王曉輝 | 申請(專利權)人: | 中國農業大學 |
| 主分類號: | C12N15/87 | 分類號: | C12N15/87 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人: | 關暢 |
| 地址: | 100193 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 rna 病毒 轉化 植物 原生 質體 方法 | ||
1.一種用RNA病毒轉化植物原生質體的方法,是將從感染RNA病毒的植物中提取的總RNA轉入到植物原生質體中。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述RNA病毒為多分體RNA病毒。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:所述多分體RNA病毒為甜菜壞死黃脈病毒。
4.根據權利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:所述植物原生質體為煙草原生質體。
5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于:所述煙草原生質體為本生煙原生質體。
6.根據權利要求5所述的方法,其特征在于:所述本生煙原生質體來自于6-8葉期本生煙的完全展開的新葉。
7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于:所述6-8葉期本生煙的完全展開的新葉在原生質體提取體系中,是以葉面積小于等于0.5mm2的組織塊的形式存在的。
8.根據權利要求1-7中任一所述的方法,其特征在于:所述轉化為聚乙二醇轉化。
9.根據權利要求1-8中任一所述的方法,其特征在于:所述聚乙二醇轉化的體系中,所述總RNA的濃度大于等于0.5μg/μl;所述總RNA、所述植物原生質體和所述聚乙二醇的配比為2-20μg:2×105個:135mg。
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