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[發明專利]一種用RNA病毒轉化植物原生質體的方法有效

專利信息
申請號: 201310029545.0 申請日: 2013-01-25
公開(公告)號: CN103060380A 公開(公告)日: 2013-04-24
發明(設計)人: 韓成貴;范慧艷;李大偉;于嘉林;王穎;張永亮;武文琦;王曉輝 申請(專利權)人: 中國農業大學
主分類號: C12N15/87 分類號: C12N15/87
代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 代理人: 關暢
地址: 100193 *** 國省代碼: 北京;11
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 rna 病毒 轉化 植物 原生 質體 方法
【權利要求書】:

1.一種用RNA病毒轉化植物原生質體的方法,是將從感染RNA病毒的植物中提取的總RNA轉入到植物原生質體中。

2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述RNA病毒為多分體RNA病毒。

3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:所述多分體RNA病毒為甜菜壞死黃脈病毒。

4.根據權利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:所述植物原生質體為煙草原生質體。

5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于:所述煙草原生質體為本生煙原生質體。

6.根據權利要求5所述的方法,其特征在于:所述本生煙原生質體來自于6-8葉期本生煙的完全展開的新葉。

7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于:所述6-8葉期本生煙的完全展開的新葉在原生質體提取體系中,是以葉面積小于等于0.5mm2的組織塊的形式存在的。

8.根據權利要求1-7中任一所述的方法,其特征在于:所述轉化為聚乙二醇轉化。

9.根據權利要求1-8中任一所述的方法,其特征在于:所述聚乙二醇轉化的體系中,所述總RNA的濃度大于等于0.5μg/μl;所述總RNA、所述植物原生質體和所述聚乙二醇的配比為2-20μg:2×105個:135mg。

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